01 巴斯德毕赤酵母 生理遗传特点 1、属于食品安全级(GRAS)微生物; 2、可以利用的碳源类型比较广泛; 3、能够以甲醇或甘油作为唯一碳源和能源进行生长; 4、适于高密度发酵; 5、可用甲醇严格控制表达。 是目前最为成熟、应用最为广泛的外源蛋白真核表达系统之一。 巴斯德毕赤酵母是生物合成乙酰辅酶A 衍生物、大宗化学品的良好底盘微生物。 启动子 巴斯德毕赤酵母表达系统中最常用的启动子是巴斯德毕赤酵母醇氧化酶基因启动子PAOX1,该启动子是甲醇诱导型强启动子,但受葡萄糖、甘油、乙醇、琥珀酸等碳源的严格抑制。 巴斯德毕赤酵母谷胱甘肽依赖型甲醛脱氢酶基因启动子PFLD1 活性受到甲醇或甲胺的诱导,其启动子强度也与PAOX1 相当。巴斯德毕赤酵母三磷酸甘油醛脱氢酶基因启动子PGAP 是组成型强启动子,其驱动基因表达的强度与PAOX1相近,由于不需要添加甲醇进行诱导表达,所以这一优势使其有望成为工业应用上最有可能替代PAOX1 的启动子。 终止子 目前,巴斯德毕赤酵母表达系统通常使用的终止子是内源的AOX1 基因终止子AOX1tt;另外,来自酿酒酵母的终止子ScCYC1tt 也被证明可以在巴斯德毕赤酵母中使用。
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