dead_king 发表于 2012-2-8 09:12:49

毕赤酵母发酵问题

大家好,我想请问下关于毕赤酵母发酵的问题,毕赤酵母耗氧量比较大,我在甘油培养时,溶氧都是在10%左右(这已经是最大转速,最大通气量了),而一用甲醇诱导时溶氧就回升,在60%左右,这样的情况正常么?
甲醇诱导时,PH一般的变化怎么样,我用甲醇诱导24h后,PH就有所上升了,超过6了,而在之前,需要氨水才能维持到6。这是甲醇不足还是中毒呢,我的甲醇加量是开始时3ml/L.h,诱导24h后提升到6ml/L.h?
大家观察过甲醇诱导时菌体的形态么,一般什么形态的菌诱导时蛋白产量会高些呢?
大家测甲醇含量,除了甲醇仪,气相,有什么化学测定的方法么?我们实验室没有条件购买那些仪器。
谢谢

三可 发表于 2012-2-8 15:42:45

诱导前期溶氧、pH上升是正常的,不升才怪。
前6-12小时建议分批次补加。待甲醇消耗完,溶氧迅速上升时再补加甲醇。
停甲醇探底是最简便的方法。没见过其它的检测方法。

dead_king 发表于 2012-2-9 13:33:47

谢谢版主 还想再请问版主
我的罐,DO 上升到60%后,不见回落,加甲醇只回落4%-5%,而后12H后再次升回原值,也不再升高,PH升了后再不见回落,一直缓慢上升。这是前期甲醇加量太大导致菌中毒,丧失活力了么?这样的升高不正常吧?
在甲醇诱导时,一般溶氧回升多少正常?
按照你的加法,在诱导期间缺少甲醇一段时间对蛋白表达影响大么?
看文献甲醇都是设定速率连续流加,我们没这条件只能一小时加一次,是不是这样造成的瞬时甲醇量过高呢?

815176867 发表于 2012-2-14 20:41:32

甘油怎么加的?加得太快了吧

dead_king 发表于 2012-2-22 09:31:54

解决了,是诱导时甲醇浓度高了,我们的菌株吃甲醇比较少,全程2ml/L.h,有时还要停加

广东发酵 发表于 2017-12-28 12:52:33

待甘油耗完,饥饿一定的时间,在低速流加甲醇,待甲醇适应ph应该是下降的吧
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