huhongmei 发表于 2012-7-18 22:07:40

种子液 pH 值变化问题

培养单细胞藻类时对种子液pH有个疑问，向大家求助：

培养基以葡萄糖作为碳源，酵母粉作为氮源，加上其它一些无机盐类。
葡萄糖是分消的，灭菌温度为121℃,30min.

摇瓶阶段和种子罐的配方一样，只是种子罐配方中提高了碳源和氮源的含量，其他成分完全一样。
然而在摇瓶培养阶段，种子液的PH 是先上升再下降然后再上升，因为先消耗氮源，导致PH上升，然后细胞消耗葡萄糖，导致PH下降，当葡萄糖耗尽后PH上升。摇瓶阶段不对ph进行控制。

然而在种子罐上时PH 变化完全不一样，PH保持一直上升的趋势，整个培养过程需要用HCL调节PH。为什么罐上和摇瓶阶段完全不一样，请各位帮我分析分析，谢谢

fe1002 发表于 2012-7-19 11:01:24

你的摇瓶怎么取样的？是一次放一个瓶子还是用一个大容量的瓶子每次取出一部分？建议你每次测pH放一个瓶子看看，

huhongmei 发表于 2012-7-19 16:40:13

是从一个瓶子中取的样品。

rachelyl2009 发表于 2012-7-19 21:56:34

建议你对种子罐和摇瓶的样品进行取样，检测碳源和氮源浓度的变化，才能找到合理的解释

huhongmei 发表于 2012-7-20 22:00:57

3楼的建议不错，我也正在考虑是不是氮源和碳源的比例不合适

梧桐 发表于 2013-5-3 15:27:53

首先，您何以判断在摇瓶内pH变化是因为碳氮源的消耗而引起的？连续取样检测糖氮？
摇瓶与发酵罐最大的区别在于溶氧。这个因素对菌种的代谢方向影响很大。您可做一组对照，接种子罐的同时，用同一批摇瓶种子液再接一组与种子罐培养基成分浓度一致的摇瓶。对比二者的变化情况。
可用缓冲盐以减小pH的变化
加大种子罐碳源的比例也可一试
甚至可以调节通气量或搅拌尝试一下，但这个要慎重。

joke 发表于 2013-7-28 23:08:17

试试使用摇瓶用种子罐的配方，如果pH一致了，说明猜想是正确的，如果不一致，说明这是摇瓶和罐的差别。向楼主学习，我们一般不会考虑这么细致。
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