ycxj 发表于 2013-9-27 13:44:47

工程菌培养补糖pH不降

我在做工程菌有几批发酵前期（约5h）流加葡萄糖来维持pH，但是pH还是不断上升，为何？
以前流加糖pH短时间即降低的
培养期间保持DO30-50%

灰领带 发表于 2013-9-27 20:04:57

糖耗正常么？用糖控制ph，糖耗要关注

细履平沙 发表于 2013-9-27 20:32:00

代谢出了问题，所以要关心耗糖。一般和种子和培养基有关系

ycxj 发表于 2013-9-27 20:54:10

当然不耗糖的，撑了三个小时后索性把通气停了，pH才缓慢下降，耗糖才开始，同样培养时长菌体量比正常培养要少
有三批类似情况了，原因不知

细履平沙 发表于 2013-9-27 21:50:03

停气后，有氧呼吸转换成厌氧发酵，有机酸积累。可能你们也是这样考虑的，但是这样只治标，关键要找到原因。可以用摇瓶设计试验找到原因。

yccc1022 发表于 2013-9-29 10:38:37

不知道什么菌，是工程菌，可能是细菌、酵母偏多些。一开始ph就朝上走，并且碳源用的是葡萄糖，正常不会是这样的。你要确认培养基对不对，有没有非标品。另外就是条件，是否是溶氧偏高了，氧化电位偏高。还有菌体本身，有否变化。
ph朝上走，溶氧朝上走了吗，如果也朝上，说明菌体在自溶了。

ycxj 发表于 2013-9-29 19:47:29

为大肠BL21，培养5h后pH上升是合理的（缺乏碳源），培养基不会出问题（买的干粉），pH上升过程溶氧是降低的，难道是搅拌转速过高，500转对菌体应该问题的
但确实降低转速溶氧跌零时，pH才开始下降
摇瓶找原因有点无从下手

zhuoyue56 发表于 2013-9-29 22:15:58

菌体正常的话 ，培养基的成分问题，可能是分解出氨 类的物质了

yccc1022 发表于 2013-10-27 20:07:57

培养基不是粉状就表示其实稳定的，特别是有机氮源，稳定性较差的。有机氮源a-n较高时，菌体代谢速度会比较快的，脱氨量大，导致ph回升快
你加大葡萄糖流加量，ph会不会下降或上升速率降低？

seven2925 发表于 2013-10-31 09:52:23

残糖浓度过高引起菌体代谢出现异常，在生产中虽然补糖可以维持PH值，但是当残糖量达到一定值时，会抑制菌体的生长，造成菌体几个小时内无变化，甚至废罐。
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