liushoujiade 发表于 2016-12-22 08:58:28

发酵过程异常

一级和二级种子培养时间过长，二级种子转到发酵培养基时溶氧急剧下降，PH偏低，转到发酵罐后溶氧异常，后期也不产生次级代谢产物。
还有一个问题是前期补水对次级代谢产物产生是否有影响？

细履平沙 发表于 2016-12-22 15:23:49

原因可以参考昨天发的公众号文章：comefajiaoren。
这里只分享一些建议：
1、培养基成份快速氮源比例高，有条件时通过摇瓶优化一下。
2、降低温度，降低前期生长速度。
3、降低接种量。
4、补水也可以起到一些效果，但是工艺不好掌握。
5、通过试验找一个可以有诱导效果的因素，比如温度比如某个前体物质，或pH。使发酵能够从生长过程转向次级代谢过程。

wnb4430 发表于 2016-12-23 08:41:19

补水是为了增加溶氧？溶氧低的原因是二级种子质量差异引起？还是发酵培养基配方不合理？先找出原因，再对症下药。

liushoujiade 发表于 2016-12-23 12:16:41

谢谢回复，我这个项目发酵以前做摇瓶小试和中试，以及十吨车间放大都很正常，配方还是比较成熟的。只是这批试验异常，种子培养时间时间过长，造成溶氧急剧下降，PH达到了3.5左右。
正常种子转发酵罐，三天之后才会发现溶氧下降，这批试验一天就出现了溶氧下降，菌浓很高。采用了降低温度和流加补水，但是后期测产量一点都没有。
以前做过一次前期补水，也出现没有产量的情况，是不是有可能前期补水造成代谢途径发生的改变。

liushoujiade 发表于 2016-12-23 12:20:53

回 wnb4430 的帖子

wnb4430:补水是为了增加溶氧？溶氧低的原因是二级种子质量差异引起？还是发酵培养基配方不合理？先找出原因，再对症下药。 (2016-12-23 08:41) images/back.gif

补水的目的，一是增加溶氧，而是保持发酵罐发酵体积不变
溶氧低的原因怀疑是种子的异常导致的

fermenter 发表于 2016-12-23 18:50:18

查查无菌，感觉是染菌了

liushoujiade 发表于 2016-12-23 19:02:39

我们感觉也是，怀疑染了和我们菌丝同样的杂菌，所以没有镜检出来，检测没有产量。由于没有做摇瓶跟踪实验，所以不敢下结论。
询问菌种室的同事，他给我做了5支斜面，给了我四支，另一支染了一种浅红色的杂菌，由于他没有镜检，也不知道染得是什么菌。有谁知道一般是什么菌吗？

打大西瓜 发表于 2016-12-27 22:07:30

我们以前开发过的一个产品（霉菌）也出现过类似异常问题，同样也是pH太低、菌浓高，溶氧下降异常，后来分析可能是染了霉菌了，仔细镜检后发现菌丝还是存在差异的。补水应该不会对菌丝代谢造成这么大的冲击，我们其他产品也在补水，从未出现过影响次级代谢的情况出现。

fermenter 发表于 2016-12-28 19:05:16

最好拍拍照，以便今后能想到这次事情 @liushoujiade

liushoujiade 发表于 2017-1-4 18:22:08

好的，谢谢，这次的经验很重要
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