shzlyjgc 发表于 2011-9-14 11:59:45

学习了，谢谢！！！

gx0406 发表于 2012-5-30 21:40:26

为减少质粒丢失，可以加大种量，尽量减少传代，直接洗菌至发酵培养基进行发酵

wangweigj 发表于 2013-9-26 22:35:18

携带质粒的基因工程菌相对于相对菌增加了额外的代谢负担，对氧需求量较大； 抗性压力，主要是防止质粒丢失，所以试验中加入一些抗性因子，很显然降低了染菌几率。
特别是质粒丢失这一块：一般来说外援质粒越大，生长越快，越容易丢失，此时可以通过培养基的培养、温度来调控；对于培养基配方，最主要的是选定合适的有机氮源酵母浸粉，这方面好像安琪酵母他们做的培养基型号很多，你可以找他们公司交流一下；在稳定上可以适当的调低温度，减缓生长时间来防止质粒丢失。

lice666666 发表于 2013-9-27 09:49:03

回 冰雪凌露 的帖子

冰雪凌露:您好版主，我赞成您的说法，工业上是不加抗生素的，请问版主这样做工业上一般采取怎样的措施来保证质粒不丢失呢？ (2011-03-29 17:15) images/back.gif

种子罐上还是加的，大罐上不加而已

vei_20004 发表于 2014-3-31 21:49:04

质粒稳定性

细履平沙 发表于 2016-12-7 19:25:33

计算质粒丢失率的方法：把菌样稀释后涂平板，从平板上面挑选200个单菌落，分别点样在含具有卡纳霉素（如质粒上有卡纳霉素抗性基因）平板上，然后37度培养，24小时后计数，便可以计算质粒丢失率

细履平沙 发表于 2016-12-7 19:58:27

发现在对数期时候容易丢失质粒。因此可以尝试降低这时菌体生长速率，如细菌长到对数期时候降低温度和摇床速度。希望能延长质粒在宿主菌的稳定性
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