关于菌种筛选的问题
各位：大家好！
我是刚毕业的大学生，刚接触菌种这一块。想请教各位前辈几个问题：
我们实验室有一批菌种，以前稀释分离都长得很好的，但最近不知道怎么的平皿上-5，-6都长不起来（以前也做-5，-6稀释分离的）。其中原料就换过酵母粉，另外都没换过，也没做任何改变。也怀疑过酵母粉的问题，但换过几批都没以前长的多。请问：到底有那些原因会出现这种问题？我该如何去验证我的怀疑并改正啊！
谢谢拉！ 我也是个新手，说说我的看法看有道理吗，当然这也是老师教给我的
1 是不是菌种保藏条件的影响呢，条件不合适队菌种的复壮是有影响的
2 酵母粉肯定是有影响的，一般还是进口的比较好
3 我发现这样一个问题：种子似乎和人一样喜欢伴生，有了很多伙伴她就愿意生活，而当就她自己的时候她就会寂寞，所以是不是可以试着在低浓度时适当的加大涂布量，这一点在做菌种抗性诱变选育时很明显
4 虽然她在低浓度下不生长，但只要我们能获得单菌落且通过初筛复筛她的性状并无较大差异就可以了
一点拙见，望大家多提宝贵意见 菌种变异的原因吧！ 我也是刚刚做这个,也出现过个别的不生长现象,当时考虑是稀释不均匀的原因 是不是菌种时间太长或是不好了,死掉的缘故呀. 有可能是菌种生长没有进入对数期的缘故。 不知你的试验其它稀释度是否长单菌藩?稀释倍数的增大只是为了能够方便地挑出单菌落,如果-3或-4能够正常生产的话,应该不存在问题. 每个梯度都涂板， 从菌落数看能形成梯度不？
如果能的话 就不是平板问题了 一般情况下,只有当新原料经验证后才能够使用,另外好的原料不要一次用完,留给对比实验用.
一个企业生产的原料,因为批次不同也会产生较大的差异,这些都是在发酵企业中常常遇到的情况.
除了原料,菌种更要注意,如果出现生产波动的情况下,要将生产稳定时的菌种拿出来进行对比,以区别是菌种问题还是其它问题. 谢谢各位！我把各稀释度做了，其中-2、-3、-4都很多的，但是到-5就突然很少了！才几颗，-6就根本长不起来了！有些-5就已经没有了！
也考虑过可能是粘在试管壁上了，换了一些新的试管用，大口的，也没用。
酵母浸出粉也换过几批，是不同批号的长出来的菌落颜色上有差别，菌落数量上总体上讲也没以前多！ 大家都谈了自己的高见，都很好，发酵是个综合因素影响的事件，学要综合考虑。