大家把自己现在发酵遇到的主要问题拿出来探讨下啊

a324120005

很多时候，发酵就是个经验积累问题，细节尤其重要。有时候我们往往觉得无法克服的难题，往往是自己忽略了某些细节。所以希望大家把自己的困难发出来，大家一起讨论。或许我们今天遇到的问题正是别人昨天所刚刚克服的。


我先说我的。我现在遇到的困难是大肠杆菌高密度发酵 出现菌密度增高而诱导不出来，或者表达量低的问题。请高手赐教啊。

vei_20004

啥意思？
诱导不出来？
是不是就只生长菌体，而不产酸呢？
1、看看菌种质粒是否缺少，质粒检验
2、磷酸盐是促进菌体生长的因素，是否太多了
3、也是一样的，原材料中某种原料导致菌体的生长，是菌体生长的关键因素进行查找
4、工艺是否有变化？

a324120005

嗯。你说对了。就是原料中磷含量太高了，谢谢！！

a324120005

为什么磷酸盐多了，就会影响表达啊？

guolei

无机盐变了没

a324120005

这个问题我遇到两种，有一种和1楼说的一样是磷酸盐加多了，减少了就好了。第二种情况是为了提高培养密度，改变了下工艺，结果密度是提高了，但是外源蛋白几乎不表达了。请教下您认为是什么影响了表达？

joke

初级代谢与次级代谢肯定有一个平衡。在某个合适的环境下，由次级代谢占主导地位，这个时间持续的时间长产物就高。所以这个合适的环境就是我们工艺人员需要控制的。同时也是矛盾，不是工艺人员的能力所达到的，因为影响因素太多。楼主说的磷酸盐加多了，就可能使初级代谢加强了，次级代谢没有及时转换。第二种情况也是密度提高了，与磷酸盐的情况类似，所以也出现了问题。诱导物能不能再增加一些？