《基因工程菌重组质粒稳定性研究》

细履平沙

重组菌的稳定性受遗传及环境因素两方面的控制，所以可以通过基因水平的控制来限制反应器中无质粒细胞的繁殖以提高系统中含质粒细胞的比例。在重组菌培养过程中通常采用增加“选择压力”来提高重组菌的稳定性。“选择压力”通常包括：
１）在质粒构建时，加入抗生素抗性基因，在生物反应器的培养基中加入抗生素以抑制无质粒细胞的生长和繁殖；
２）利用营养缺陷型细胞作为宿主细胞，构建营养缺陷型互补质粒，设计营养缺陷型培养基抑制无质粒细胞的生长和繁殖；
３）噬菌体抑制及转化子中自杀蛋白的表达，在含“选择压”的培养基中培养基因工程菌可以有效地抑制无质粒细胞的生长和繁殖，提高质粒稳定性。这种方法对于质粒或宿主细胞本身发生了突变，虽保留了选择性标记、但不能表达目的产物的细胞无效。
摘自：生物技术通报：《基因工程菌重组质粒稳定性研究》