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关于活菌染色问题

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发表于 2007-5-4 18:07:50 | 显示全部楼层 |阅读模式
带鞭毛的杆菌直接镜检时,可以看见在疯狂的游动.为什么一滴上美蓝就不动了呢?(美蓝的配制用的是 美蓝0.2克 蒸馏水1000毫升)
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发表于 2007-5-4 18:33:28 | 显示全部楼层
因为是活性染色,必须保证染色后细胞是活的
首先染色剂pH值对染色影响很大
在者就是染色剂的浓度,成分
楼主美篮染色液配方貌似不太科学
不知道楼主有没有考虑这些
人生就象个发酵罐,需精心调控!
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 楼主| 发表于 2007-5-4 18:43:43 | 显示全部楼层
没测PH,以前用的按书上的配方也这样啊?以前还加 氢氧化钾 乙醇
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发表于 2007-5-4 19:45:02 | 显示全部楼层
对,你说的那个应该是最常见吕氏美蓝染色液
还有其他的 原料葡萄糖、氯化钙等配制
但是也有直接用美蓝和蒸馏水配制的美蓝染色液

还有鞭毛染色实验要求很高,难度比较大
用简单的染色法效果不好、甚至错误
最好是用复染
再者鞭毛染色对菌种的培养时间、条件、染色液、操作细节有很大的关系
具体你可以参考鞭毛染色,相关资料应该好找
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 楼主| 发表于 2007-5-4 20:28:05 | 显示全部楼层
我用染色,是想用显微镜辨别细菌的死活.你有好的配方吗?给来几个行不?
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 楼主| 发表于 2007-5-4 20:28:58 | 显示全部楼层
制的是活片染色
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发表于 2007-5-4 20:59:55 | 显示全部楼层
你通过看鞭毛是不是活的?
判断活死看颜色就可以了
死的是蓝色或者浅蓝色
活的无色
不知道你镜检后具体是怎么样的,不过前提是染色没问题。
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发表于 2007-5-9 22:38:14 | 显示全部楼层
美蓝浓度和染色时间过长都会增加菌的死亡,我们用曾经用美蓝染活片,涂片中的细菌全部死亡,细胞代谢全部停止不能使染液中的美蓝还原,镜下细菌全被染成蓝色而不能区分细菌死活
QQ80909698,QQ群651027,学习1群,问题请论坛交流。
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 楼主| 发表于 2007-5-10 18:00:29 | 显示全部楼层
对啊!我就用0.2克的美蓝,加1000毫升的蒸馏水,配出的染料,做活片时,杆菌全部成蓝色,不在游动.(直接镜检,不染色,可以看见杆菌在疯狂的游动)
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