二丁酰环磷腺苷钙质量标准

sunlangwolf

二丁酰环磷腺苷钙

Erdingxianhuanlinxiangangai
Calcium Dibutyryladenosine Cyclophosphate

C18H23N5O8P•1/2Ca  488.45
本品为N6-2’-O-二丁酰3’,5’-环磷腺苷钙盐，按干燥品计算，含二丁酰环磷腺苷钙（C18H23N5O8P•1/2Ca）不得少于94.0％。
【性状】本品为类白色至淡黄色粉末；有特臭，有引湿性。
本品在水中略溶或微溶，在乙醇和乙醚中几乎不溶。
【鉴别】（1）取本品适量，加稀硝酸溶液溶解后，加钼酸铵试液，加热约10分钟后，生成黄色沉淀。
（2）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
（3）取本品少量，加水溶解后，加草酸铵试液，产生白色混浊，加稀盐酸溶解，加稀醋酸不溶。
【检查】溶液的澄清度与颜色  取本品0.1g，加水25ml溶解后，溶液应澄清（中国药典2005年版二部附录 IX B）；如显色，与黄色4号标准比色液（中国药典2005年版二部附录 IX A 第一法）比较，不得更深。
酸度  取本批0.1g，加水25ml溶解后，依法测定（中国药典2005年版二部附录VI H），pH值应为5.0～6.5。
有关物质  取本品，加流动相溶解并稀释制成每1ml约含0.5mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，加流动相稀释制成每1ml约含5μg的溶液，作为对照溶液。照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10％～20％；再精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的4倍，供试品溶液的色谱图中如有杂峰，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的8倍（8.0％）
吡啶  取本品适量，精密称定，加N,N-二甲基甲酰胺溶解并稀释制成每1ml约含0.1g的溶液，作为供试品溶液；照残留溶剂测定法（中国药典2005年版二部附录VIII P 第三法），以DB-WAX为固定相，柱温220℃，进样口温度300℃，氢火焰离子检测器温度150℃，理论板数按吡啶峰计不低于1000。精密量取供试品溶液1μl注入气相色谱仪，记录色谱图。另精密称取吡啶适量，同法制成每1ml中含吡啶20μg的溶液作为对照品溶液，同法测定。供试品溶液色谱图中如有吡啶峰，按外标法以峰面积计算应不得过0.02％。
干燥失重  取本品，以五氧化二磷为干燥剂，在100℃减压干燥至恒重，减失重量不得过6.0％（中国药典2005年版二部附录VIII L）。
【含量测定】 照高效液相色谱法（中国药典2005年版二部附录V D）测定
色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L的磷酸二氢钾溶液-乙腈（75:25）为流动相；检测波长为273nm；理论板数以二丁酰环磷腺苷钙峰计应不低于2000。
精密称取本品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml约含25μg的溶液，作为供试品溶液，精密量取20μl注入色谱仪，记录色谱图；另取干燥至恒重的二丁酰环磷腺苷钙对照品，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。
【类别】蛋白激酶激活剂。
【贮藏】密封，在阴凉处保存。
【制剂】注射用二丁酰环磷腺苷钙



二丁酰环磷腺苷钙质量标准（草案）起草说明
1. 名称
根据《中国药品通用名称》及命名原则，本品中文名为：注射用二丁酰环磷腺苷钙；汉语拼音名为：Zhusheyong Erdingxianhuanlinxiangangai；INN名为：Calcium Dibutyryladenosine Cyclophosphate
2. 性状
本品为类白色至淡黄色粉末；有特臭，有引湿性。本品在水中略溶，在乙醇和乙醚中几乎不溶。原标准有错误：本品在水和乙醇溶解纯属错误，主要原因是其中杂质多，原料不纯，只有80％左右的含量，导致本品在水和乙醇溶解。
3. 鉴别
3.1利用磷酸盐化学鉴别特征反应：PO43-在酸性介质中， PO43-与钼酸铵反应，生成黄色磷钼酸铵沉淀。
PO43-+3NH4++12MoO42-＋24H+ ＝ (NH4)3PO4•12MoO3•6H2O↓+6H2O
3.2 HPLC鉴别
在含量测定项下，六批样品主成分峰的保留时间均与对照品的保留时间一致，专属性较强。
3.3 利用钙盐化学鉴别特征反应
Ca2+ + C2O42- ＝ CaC2O4↓(白色)
CaC2O4 + 2H+ ＝ Ca2+ + H2C2O4
4. 检查
4.1 酸度
六批样品的pH值均在5.0～6.5之间。综合试验结果,我们将pH范围定为5.0～6.5，原标准中原料杂质多，分离不彻底，导致pH低，原料和制剂不稳定，存储时间短。
4.2 溶液的澄清度
参考国家标准WS-10001-（HD-0786）-2002的方法并根据六批样品试验结果，将溶液的澄清度定为：取本品0.1g，加水25ml溶解后，溶液应澄清。
4.3 溶液的颜色
参考国家标准WS-10001-（HD-0786）-2002的方法并根据六批样品试验结果，将溶液的颜色定为：取本品0.1g，加水25ml溶解后，如显色，与黄色4号标准比色液比较，不得更深。
4.4 有关物质
通过对本品有关物质检查方法进行方法学验证，并经降解试验，结果表明，在此色谱条件下各降解产物与二丁酰环磷腺苷钙主峰的分离度均大于1.5。采用1%自身对照法测定各杂质含量，六批样品有关物质均不超过8.0％。参照这一限度要求，我们将有关物质的限度定为：各杂质峰面积之和不得过对照溶液主峰面积的8.0倍。
4.6 吡啶
4.5 干燥失重
六批样品的测定结果均低于4～6.0％。而国家标准WS-10001-（HD-0786）-2002为7.0％～15.0％。这是完全错误的，本品在五氧化二磷、65℃减压干燥3小时，减失重量不高于5.5％；用卡法测定水分也绝对不高于5.5％。如果水分超过7.0％，则纯属造假！实际上，本品根本不存在2.3个结晶水，结合生产情况，我们将水分定为不得过6.5％。
5. 含量测定
本品含量测定采用有关物质检查色谱条件及进样浓度，对该方法进行了验证。进行了线性试验、重复性试验、耐用性试验、溶液稳定性试验、回收率试验、中间精密度试验，含量测定重复性良好。具有较好的系统适用性。
结合生产情况及国产同品种的规定，我们制定含量限度为：按干燥品计算，含二丁酰环磷腺苷钙（C18H23N5O8P•1/2Ca）不得少于90.0％。
6. 类别
本品为蛋白激酶激活剂。
7．贮藏
根据稳定性试验结果及参考有关标准，确定本品密封，阴凉处保存。

（来源：DXY）