求助菌种活化

卧听风雨

我买的一株霉菌冻干粉，在冰箱里放了有2个月，才开封活化，第一次，接了2管，28度长得还好；第二次转接将这2管各接2管斜面，结果就有问题了，第一管转出来的2个斜面长白色菌体很旺盛，不长孢子，一直到10天以后，其中一管才长出孢子，而第二管转出来的2个斜面，大概六天左右，都长出了孢子，但是形态不好，因为用的查氏培养基，我又调整了一下糖浓度，做了几管平行看效果，可是我发现，同一管接出来的菌，长得快慢都不一致，这是第六天了，有一管长好了基本上，另外几管都保持在生长第三天的状态，没有改变，请问这是为什么啊？还有，我同时用平板涂布做单菌落，发现同样的培养基，平板上菌生长状态比斜面好的多，请大家给我的建议，非常感谢！

infofy

菌种可能有些退化了。可以考虑将培养出来的单菌落扩大培养，得到较纯的菌落。再做斜面培养。

卧听风雨

谢谢你的建议，我试一下

minger

不知lz是如何转接的。霉菌是否纯化孢子后转接为好，因为菌丝年龄是否同步会影响菌的进一步生长，所以可能会出现生长差异的问题
平板比斜面长的好，是否氧气问题，或者平板划线接种时将优势菌龄的孢子分离开来，所以长势好？
这需要进一步实验确定。

卧听风雨

谢谢楼上，我是做了单菌落分离，但是我把所有稀释倍数的均悬液都涂布了平板，所有平板长得都很好，我又挑出几块单菌落，接到斜面上，还是良莠不齐，觉得这个事情很棘手，如果是氧气的问题的话，我用的是硅胶塞，透气性应该还好吧，不知大家有什么建议？

fish

试试棉塞看看！

卧听风雨

好，我试下，谢谢

menandachen

引用第3楼minger于2008-09-18 15:38发表的  :
不知lz是如何转接的。霉菌是否纯化孢子后转接为好，因为菌丝年龄是否同步会影响菌的进一步生长，所以可能会出现生长差异的问题
平板比斜面长的好，是否氧气问题，或者平板划线接种时将优势菌龄的孢子分离开来，所以长势好？
这需要进一步实验确定。

可能是菌种有些退化了，同意用孢子转平板后接斜面，生长同步性可能会好些。由于是霉菌，可以制备孢子悬液后分离纯化得优势菌。

menandachen

[quote]引用第4楼卧听风雨于2008-09-19 21:10发表的  :
谢谢楼上，我是做了单菌落分离，但是我把所有稀释倍数的均悬液都涂布了平板，所有平板长得都很好，我又挑出几块单菌落，接到斜面上，还是良莠不齐，觉得这个事情很棘手，如果是氧气的问题的话，我用的是硅胶塞，透气性应该还好吧，不知大家有什么建议？[/quote


我做斜面的时候硅胶塞的水气明显比我的棉塞多很多，我想是水蒸气是难以散发出去吧

卧听风雨

出去了一段时间没来及上网，谢谢大家给我的建议，我的问题基本解决了，是硅胶塞的问题，换成棉塞就好的多了。