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[菌株构建] 如何进行菌种工作

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发表于 2008-11-4 21:09:17 | 显示全部楼层 |阅读模式
今天公司拿来几管菌种,基因工程菌  毕赤酵母 做植酸酶的,
现在是新车间用, 马上面临生产,  该如何进行下面的工作,请大家畅所欲言。
谢谢。
进行活化的话是用斜面好还是放液体培养基摇瓶好呢?
保藏的话用多少浓度的甘油?以及甘油与菌液的比例?
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发表于 2008-11-6 14:33:55 | 显示全部楼层
我觉得用斜面和平板活化菌种好些
用甘油保存我一般使其终浓度在20%-25%,甘油浓度你自己控制就行,主要是自己操作方便。
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 楼主| 发表于 2008-11-6 20:23:54 | 显示全部楼层
谢谢zhangjie0114的热心回复。
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发表于 2008-11-21 10:54:50 | 显示全部楼层
1.进行活化的话是用斜面还是好于放液体培养基摇瓶的。
2.基因工程酵母的保存方法:你可以将酵母菌在液体培养基培养3~5天,然后与100%甘油1:1混合冻存即可.即甘油浓度50%。
发酵老手,论坛新人!
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发表于 2008-11-22 10:30:02 | 显示全部楼层
这么好的回答竟然没有加分!?
发酵老手,论坛新人!
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发表于 2008-12-6 10:23:01 | 显示全部楼层
要用甘油保藏的话,最好是在对数期,酵母类一般摇床培养12-16小时,过夜培养后保藏就可以。基因工程菌与野生菌是否保藏方法不一样,我就不知道了
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发表于 2008-12-6 10:55:00 | 显示全部楼层
大家怎么没有说说为何斜面和平板活化要好于液体活化呢。

是不是因为液体活化会造成传代过多吗
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发表于 2009-5-19 15:22:15 | 显示全部楼层
斜面和平板活化与液体活化都可以,液体活化如果时间控制得好,不会造成传代多的现象;基因工程菌与野生菌一样,要用甘油保藏的话,最好是在对数期,一般摇床培养20小时左右,过夜培养后保藏就可以。
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发表于 2009-8-13 13:27:37 | 显示全部楼层
公司从外地拿来的菌种,一般情况下是保藏很久的,加之到你公司后由于环境条件的不同,所以,建议第一:最好采用自然分离后,经初筛、复筛选育后的高单位菌种保藏后再使用,以便提高原来菌株的生产能力和存活率。
第二:也可以采用转接斜面培养后,挑选生长良好的菌块使用。目的:其一,提高存活率;其二:挑选那些生长良好的菌块相当于进行一次筛选。
保藏菌种甘油的浓度一般在10%—20%,甘油与菌液应按1:1的比例搭配。
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