我们大肠杆菌发酵，摇瓶生长不错，进罐就不长，什么原因

liuyi6169

请教：我们大肠杆菌发酵，摇瓶生长不错，进罐就不长，什么原因？怎么解决?
比以前延长10多小时才开始生长，有时甚至自溶（溶氧回升），增长不快。OD值时高时低，酶活大部分时候正常有时不正常，有一次OD高但酶活却很低很低？怎么回事呢？能帮我设计解决吗？谢谢！

vei_20004

1、延迟期增加，种子配方有变化？
2、环境对于菌种不适应
3、自溶是否有噬菌体存在？

fajiaoren45

因为罐灭菌时升温和温降度慢，整个消毒周期长，产生的有毒物质多，而你的种子活性又不够，这就导致同样的接种量在摇瓶上生长速度快而在罐上生长的慢的情况。

wzr0919

你们是不是有原料换批号了，主要原料的更换可能引起发酵生长延迟

细履平沙

我提供一个解决问题的思路：
你的问题是放大的问题，在放大过程中出现的差异，不知道差异的主要原因是什么。那么我们就先将这个大问题化分成几个阶段。然后一段一段分析。
首先分成两段，一段是发酵前问题，另一段是发酵过程控制问题。分段之后，如何分清是哪段出现了问题呢？只有试验来解决。
首先按照自己正常的情况配制、消毒摇瓶，然后取发酵罐配后培养基分装到摇瓶，再按照摇瓶的标准进行灭菌，待发酵罐按照目前的工艺消毒完毕之后，取无菌样，分装到无菌摇瓶中。
这时我们有了三种摇瓶培养基，然后就可以接种了，每种培养基都分成两组，分别接种子罐种子和摇瓶制作的种子。
最后同时进行培养。
相信经过这样的组合试验便可以将问题分析的范围缩小了很多：
1、种子罐问题。
2、培养基问题。
3、种子问题。
4、大罐消毒问题。
5、大罐培养问题。
问题缩小之后，还是找不到根本问题，这时再设计试验将问题再进行分段。
当小到一定程度时，问题便可解决了。

细履平沙

发酵过程中问题总是会出现，关键是出了问题后，知道如何去解决。论坛的功能可能不是给出直接的解决办法，而是提供给很多可能与解决思路。在这里交流的是思想，而不是工艺诀窍。

phly1978

发酵过程中问题总是会出现，关键是出了问题后，知道如何去解决。论坛的功能可能不是给出直接的解决办法，而是提供给很多可能与解决思路。在这里交流的是思想，而不是工艺诀窍。
楼上说的太好了

fj109

1 菌种的质粒性能不稳定
2 在发酵罐的条件不大适合菌种
从这两方面考虑，做些改进

liuyi6169

以前是成功的，现在经常出现延迟期过长或者自溶情况，或者两者都有。

mustdo

不知道是玻璃罐还是不锈钢罐，发酵罐本身在使用之前有做好前处理吗？

菌种每次都是在摇瓶中生长较好，进罐就不行了？有做摇瓶与发酵罐的同步平行实验对比吗？

保菌很重要的。

培养基的配置或是灭菌或是接菌存在污染吗/?