摇瓶发酵时补加前体的问题

waiwaiyan

       因为前体对菌体生长是有害的，所以在罐上补加时都是流速很小且连续补加。现在要用摇瓶发酵来筛选高产菌株，试了很多种方案，最终还是一补加前体，摇瓶单位就会很低，几乎没有单位。
    现在试过的方法有：将补加量减少一半，2/3； 或者 在摇瓶发酵的第三天（进入生长稳定期）补加少量的前体，之后就不补加了； 或者 在摇瓶发酵放瓶的前一天补加少量前体。 这些方法试下来的结果都是没甚么单位。
    现在我不知道下一步该怎么做了，如果摇瓶不补加前体的话，单位很低而且每株菌的差异不大。
    恳请哪位前辈赐教，在下不甚感激啊~~~~！！！

waiwaiyan

唉。。。  没人知道么？？ 等待中

zspjkcs

首先选出耐底物菌种，根据耐受浓度，在不同时间加入底物，然后调制最适ＰＨ，进行考察。

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提供一个摇瓶补加前体的方法
摇瓶连接一小型蠕动泵，设定好补料流速（流速可以设定很低）就可以实现摇瓶的补料了

细履平沙

将前体稀释后再多次补加,这样比较辛苦,3楼的方法可以试试.

lswhl

补加次数多的话会严重影响最终的发酵单位

dangjn

前体物少量多次补加

leigui

可以做成滴丸，加进去有缓释作用，降低对菌体毒性，隔一段时间加一次，染菌几率也少一些。

hasinzhou

摇床转动中，摇瓶运动幅度是很大的，频率也很高，补料管不是很容易 承受的 ，
另外，我们培养的一般是耗氧菌，摇瓶塞子要做成通气塞 ，试问 三楼 您是如何固定补料管在摇瓶里的长度的？ 还有 ，您是怎样解决塞子中间的管子运动中产生缝的问题？  菜谱就在那里，并不是都是大厨？     我建议：  为提高试验效率，改用微型发酵罐！

hasinzhou

我也遇到过这个问题，没有解决办法，如果能用蠕动泵，那就真的太好了，
可是，你想啊 ，一个摇床里全是拴着小辫子的高速运动的瓶子，好难想象啊，