紧急求助:DNS法测还原糖冷却后变混浊，静置几个小时后白

wzhenjun

大家好,我配的DNS试剂放置了一段时间,都快两个星期了,用它来测定还原糖含量,冷却稀释后短暂时间内还是澄清透明的,可是几分钟后就变得混浊了,无法用比色法测定吸光值.而以前我师兄做的时候没有这种情况,现在的DNS是我自己配的,配方与师兄的相同.
现在很着急,希望指点.

wzhenjun

我后来又做过几次，有一次的情况是这样的，从发酵罐取的三个样测还原糖后变混浊了，而剩下的几个摇瓶的样却没有，有此可以判断DNS应该没有问题，但是二者培养基是一样的，离心也是一样的，也是同时测量的，实在找不出原因，难道是发酵过程中代谢产物不一样？

细履平沙

重新配一个DNS试剂,是不是酚的量大了.

wzhenjun

引用第2楼细履平沙于2009-02-26 20:51发表的  :
重新配一个DNS试剂,是不是酚的量大了.

我最近又做了一次，用的是原来的DNS，这一次为了排除是离心得到上清夜中有固体颗粒，我1万转离心20min，测完之后这种情况也是有的，把测样静置一段时间，在刻度管底部发现有一些白色粉状沉淀。
过一会准备到其他实验室借一些DNS，看看是不是还有这种情况

wzhenjun

引用第2楼细履平沙于2009-02-26 20:51发表的  :
重新配一个DNS试剂,是不是酚的量大了.

下述是我所用的DNS的配置方法，我师兄留下来的。
DNS溶液的配置
    （1）称取14 g氢氧化钠，溶解在200 mL的去离子水中；
    （2）称取7.5 g3-5二硝基水杨酸，溶解于300 mL去离子水中；
    （3）称取酒石酸钾钠216 g溶解在200 mL氢氧化钠溶液中（即第一步所配的溶液），然后再一起加入到（2）中混合；
（4）量取5.5 mL苯酚，称取6g无水亚硫酸钠，一起加在（3）中，混匀，用去离子水定容到1000 mL，避光保存，备用。

wzhenjun

解决了，水的问题。

liuzhuo518

那个水的问题？是配DNS的去离子水，还是样品中的水的问题？

wzhenjun

引用第6楼liuzhuo518于2009-03-26 11:43发表的 Re:紧急求助NS法测还原糖冷却后变混浊，静置几个小时后白色粉状物体沉 .. :
那个水的问题？是配DNS的去离子水，还是样品中的水的问题？

冷却后定容到所需体积时所用的水需用去离子水，因为DNS碱性，会与自来水中的矿物粒子反映生成沉淀，比如氢氧化镁。