请教补料瓶的使用

ycxj

以前没用补料瓶，现在想做流加培养，但易污染，有没有正规的使用方法，包括灭菌及使用操作？

whbio

盖与瓶间要有硅胶密封。瓶盖上一般要有两个口，一个用来抽液体，此口向内连接的管必须伸到瓶内液面下，向外连接的管在灭菌时需扎紧，以防止压力波动时逃液，管口若在灭菌时不与发酵罐连接，则需用纱布和牛皮纸扎起来，用时采用火焰保护法与发酵罐连接；另一个口为呼吸口，用来平衡内外压力，此口向瓶内侧无需接管，向外侧需接0.2微米的空气过滤膜，灭菌时过滤膜可包上牛皮纸以防打湿，此管要保证畅通，以防炸瓶。
刚灭完的瓶不能用冷水冷却，会破的

ycxj

呼吸口的连接   我是用软管一端连接呼吸器一端连接针管罐插进瓶中，输液管末端包扎针头

谢谢指导，呼吸口我没有包扎，我担心瓶内空气出不来，高压时炸瓶，这样可以吗
还有现在市场买的小呼吸器高压后可反复使用吗？

bio_tec

1楼说得很具体了。还有一种情况就是，如果发酵罐上预留了硅胶垫密封的加料口的话，补料瓶上的出料管末端应装上钢针后与补料瓶一起灭菌。

whbio

不知楼主指的呼吸器是啥样的？我们一般用的是一次性的膜过滤器(聚四氟乙烯膜)，可耐高温灭菌(不是所有的膜过滤器都耐高温哦)，说是一次性，因为只是呼吸时过滤空气，可以反复多次使用。
膜过滤器可以不包，问题不是很大