碳氮比优化如何操作？

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本人做芽孢杆菌培养基优化，单因素结果葡萄糖、酵母膏最佳浓度分别是2%和0.8%(体积分数)，想进一步做C/N的优化，请问大家如何进行操作？？我的方案是改变葡萄糖浓度以调整C/N，或是用无机氮调节碳氮比，哪种更合理？谢谢！！！
顺便问一下，我在配培养基时，加入磷酸盐和硫酸锰会有絮状沉淀，如何解决？

细履平沙

后者可以通过将硫酸锰单独灭菌实现.
我感觉用摇瓶进行C/N比的结果放大起来比较会比较困难,特别是碳源和N源加量的考察.因为发酵罐和摇瓶差距很大.在罐上能够利用完全,在摇瓶就利用不完.
如果你的品种适合,那么可以使用均匀设计进行.

荆棘鸟

呵 又遇见做芽孢杆菌的仁兄了，不过在碳氮比的问题上，我也是经验不足，一些资料上也写的比较模糊，都是要考自己摸索的，书上只是提供了一个方向。
我觉得还要考虑 你所用的那种菌种，对碳氮的利用情况。
如果你考虑加无机氮的话，要注意，无机氮是一种快速氮源，它的使用会带来PH的变化。

topmit

1楼的说得对.
用均匀设计,两因素多水平操作,比较高效.
不过,我不明白总版主为什么说,如果你的菌种合适的话,这和菌种有关系吗?

我也在做碳氮比!欢迎讨论

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谢谢各位。。。
碳氮比虽然优化了，效果并不好，目前本人做芽孢杆菌最大的问题是菌密度怎么弄都上不去，最多才20亿/ml，文献上轻易都能达到每ml　50亿上百亿，现在很是郁闷。不知楼上的仁兄情况如何。我也想问版主同样的问题，什么品种适合于均匀实验，看到不少文献中用到均匀实验。

细履平沙

我的意思可能没有表达清楚,我是说有些品种在摇瓶中进行了C源和N源的实验,而后放大起来却很困难,原因我已经解释,可能有些品种却比较顺利或不需要放大,只是目前的水平就可以,所以我说的"如果你的品种适合,那么可以使用均匀设计进行",不是指"均匀设计与品种有关,而是指进行了C:N优化后进行放大的效果,与品种有关".

荆棘鸟

我觉得 你们做到 20亿/ml 不错了，20亿和 50亿 我觉得差别不是很大，虽然表面数量上看起来差很多，但是我们做检测到时候  也要看，最起码两者都是在同一个数量级上， 如果说 20亿和 上百亿，那样的话就差别大了点，我想你们条件再控制好点 ，能否提上去呢。
再者，你说20亿，我想也不是每次都是吧，应该有一个波动范围吧，比如有时候高点有时候低点

如果想提高的话还有一个方法就是离心收集喽。 河北一个厂家提供的芽孢菌粉的 样品 他说有200亿 我检测 80亿 。

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我们做摇瓶菌浓度也就是10亿/ml，上发酵罐分批发酵时碳氮源浓度在摇瓶的基础上加倍，菌浓度翻了一翻，做了两次结果都差不多。菌数用测OD值估算，第二次涂了平板计数，涂平板结果可以达到50亿，比测OD值算的结果高，如果是50亿的话，达到百亿就有希望了。现在我也想请教一下大家，哪种计数的方法准一些呢？

细履平沙

同一个样品多测几次看看结果的精密度如何,然后再去考虑准确度.

topmit

严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的摩尔数比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比.例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加.再如,在抗生素发酵生产过程中,可以通过控制培养基中速效氮(或碳)源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与抗生素的合成.