发酵罐长期染菌求助高手

sx1066

我们采用到是2级种 3级 发酵罐大肠杆菌培养模式。现在2级 3级种子都不染菌但是3级接到发酵罐里面培养到6时-24时左右基本上不是6时染就是12时18时染现在是每罐都在染长杆，一直都在想解决办法，也一直都在查，可是就是查不出来染菌原因！从发酵罐~3级种子罐到流加罐都查了，空气系统也查过，各个罐包括焊缝各个连接面都查过没发现很大的问题。发酵罐空消前都加10公斤左右的甲醛还是解决不了！·请高手指点

sown3997

根据你的描述分析：1、染菌较快，应该是发酵液一开始就带菌。2、杂菌的来源可能是发酵液灭菌不彻底、补料管道或发酵罐内有死角或者积料，特别是移种管道。3、你所说“各个罐包括焊缝各个连接面都查过没发现很大的问题”是什么意思？应该是没有任何问题才行。
发酵这个行业是细节决定成败的！希望楼主早日找到染菌原因！

lanmadao2

设备有死角，灭菌不彻底

灰领带

“发酵这个行业是细节决定成败的！”
非常认同
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amaoni

消毒不彻底，设备有死角；种液本身带有杂菌；环境消毒灭菌不彻底，加强发酵环境的消毒与维护工作

ddff

空消试试看

sulei

前期就染菌，说明杂菌量大，问题比较严重。
每次染同样的菌，推测设备有死角，灭菌不彻底的可能性大。
发酵罐用甲醛没效果，推测发酵罐本身原因不大，除非是蛇管漏。
首先确定是哪部分有问题，
1，将发酵罐配料灭菌后不接种培养，看是否染菌。
2，三级种子延长培养时间，看培养后期是否有杂菌。有可能是3级种子培养时间短，杂菌量少，移种入发酵罐后才体现出来。
3，空气系统无菌培养。
4，发酵正常生产，不补料，看是否是补料的影响。
5，加强环境消毒。

sx1066

查罐发现的问题都很小只是焊缝上有几个很小的砂眼也就针尖那样的
3级种14-16小时成熟。接种以后的平板都保留了没发现什么问题，各种流加物料，在流加前都取无菌样检测也没有染菌

wenshui

6楼说的很有道理。我觉得你首先用排除法，大罐先进行空培，大罐的问题还是种子罐或是移种管道的问题先分开。

liaofei5750

六楼说得太好了。看你描述的情况，染菌这么快，应该是在接种的时候就有杂菌了。原因不外是1、种子带菌；2、培养基没灭透；3、设备有死角或渗漏（包括管道，阀门）4、空气系统。楼主如果有时间的话，最好能将你们检查方法说一下，也方便大家讨论，这样可以提出一些更细节的方面，像现在这样即使回答也说不到点子上，只能说个大的方向！