用营养缺陷或阻断株的作用

细履平沙 · 发表于 2006-12-8 12:56:46

记得做利福霉素的发酵工艺优化课题时,我们实验室有两个菌株,一个是生产利福霉素SV(rifSV),一个是生产利福霉素B(rifB),前者是后者的一个阻断株.
在对一个品种进行培养基优化时,也可以将这种策略施加到另一个菌株上,如果都有促进作用,说明作用点在阻断位置前,如果对rifB有作用,而对rifSV没有作用,可能推断作用在阻断点之后.
这样做,很简单,但是也很有用,主要是为了防止人家说,自己的论文水平低,没有机理,只是一些"加加减减"的小伎俩.
不知朋友们的实验使用这样的策略否,如果有,也请跟贴说明一下,我们交流交流.

云中漫步 · 发表于 2006-12-8 13:05:47

什么是阻断株？是指缺陷型菌株吧？

mission · 发表于 2006-12-8 21:21:24

Matao,
看一下这张代謝图就知道作者在讲什么了.

mission · 发表于 2006-12-8 21:45:50

rifSV 株是从rifB株筛选到的吗? rifSV的产量比rifB高, 还是低?

如果利用基因工程将rifSV 到rifB的基因knock out, rifSV and rifB产量有区别吧?

论文水平高低, 一看理论性(有新颖之处和普遍性), 二是看实用性(如果你通过media optimization, 将rifB 或rifSV产量捉高好几倍).

如果做了media optimization, 产量没有真正提高, 阻害假设没证明, 别人说你"加加减减", 也在情理之中.

mission · 发表于 2006-12-8 21:48:31

版主,

注意到没有, 最近发帖次数, 不增加?

云中漫步 · 发表于 2006-12-9 08:57:58

kexueh 谢谢！谢谢！谢谢！谢谢！谢谢！谢谢！谢谢！谢谢！谢谢！谢谢！
你在那里留学？

mission · 发表于 2006-12-9 11:32:51

Matao,

这么谢的话, 以后可了敢多说了.
在外面养家抚口!

细履平沙 · 发表于 2006-12-9 11:45:18

rifSV 株是从rifB株筛选到的.不是基因工程菌.SV的发酵单位是rifB的1/2.
如果敲除基因,应该也可以得到,但是不知道结果会如何.关键在于中心代谢途径是不是会改变!如果中心代谢不发生改变的话,利福霉素SV的单位不会低.

mission · 发表于 2006-12-11 11:29:44

Interesting! 产量降了1/2!
培养基优化后, 产量增加了多少?
Are you sure 在rifSV株, 中心代谢途径改变了?

细履平沙 · 发表于 2006-12-11 21:44:29

因为是生产菌株,所以培养基优化后,大约提高10%.
产量是低了一半,这个可以在文献中查到.
我进行代谢流分析,发现rifB中HMP途径是重要的限制因素.在SV中也是.但是比例不同.不知道这能否说明是中心代谢途径改变了呢?

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