NTG 诱变方法推荐

细履平沙

1、先制备菌悬液；

2、称取5mg NTG 加入到灭好菌的离心管中, 用几滴丙酮助溶, 再加入0.2mol L pH6.0 的磷酸缓冲液1mL 震荡稀释至完全溶解, 取菌悬液4mL 倒入含有NTG 的离心管中, 充分混匀后于37 ℃振摇0、20、30、40 、50 、60min, 离心, 冷生理盐水洗涤2 次, 加入5mL 无菌水制成菌悬液, 稀释后涂平板。取未经NTG 处理的菌液稀释涂平板做对

照, 于37℃培养1～ 2d 后计数, 并计算致死率。

3、取合适致死率下的诱变菌进行下步试验。