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[菌种选育] 一种菌种筛选方法

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发表于 2006-12-28 19:46:18 | 显示全部楼层 |阅读模式
青霉素法 penicillin method  
  
用加有青霉素的培养基来选择细菌的营养缺陷型的一种方法。也就是由于青霉素是细菌细胞壁的合成抑制剂,利用其可杀死正在繁殖的细菌的性质,对所有青霉素敏感菌的一种方便的选择法。例如将细菌先在完全培养基中培养24小时,离心分离菌体,即用生理盐水(0.85%—0.95%NaCl溶液)反复离心洗涤2—3次,然后在加有青霉素(100—300单位/立升)的基本培养基中于最适温度中培养24小时。这时不是营养缺陷型的原来野生型细胞会因不断分裂而被青霉素所杀死。然后将菌悬液放在完全琼脂培养基进行平面培养,在平面上长出来的菌落大多为营养缺陷型。通过与影印法并用,可高效率地分离到变异菌株。
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 楼主| 发表于 2006-12-28 19:50:47 | 显示全部楼层
夹层培养法(layer plating method)

 步骤是:先在培养皿中倒一层不含细菌的基本培养基,待冷凝后,加一层含菌的基本培养基;冷凝后,再加一层不含菌的基本培养基,经培养出现菌落后,在培养皿底上相应的位置做上标记,然后加一层完全培养基。再经培养后出现的菌落,多数是只能在完全培养基中生长的营养缺陷型,上、下两层基本培养基的作用是使菌落夹在中间,以免细菌移动或被完全培养基冲散
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 楼主| 发表于 2006-12-28 20:04:46 | 显示全部楼层

氨基酸营养缺陷型突变株的筛选

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 楼主| 发表于 2006-12-29 16:26:05 | 显示全部楼层
亚硝酸诱变选育黄霉素高产菌的研究
作者:王 惠 童应凯 吴兆亮 胡金刚 期号:2006年第8期  
     
     摘 要 采用亚硝酸诱变方法对黄霉素产生菌进行诱变处理,利用菌株抗自身代谢物的特征,在添加高浓度黄霉素的分离培养基上选育获得优良高产突变株sg2-N2-2,比发酵菌株的发酵单位提高了7.2倍,而且变株的菌落形态与亲本菌株差异较大。
    关键词 黄霉素;亚硝酸诱变;菌种选育
    中图分类号 Q815
Research on screening of high yielding flavomycin strain by mitrous acid mutation
Wang Hui, Tong Yingkai, Wu Zhaoliang, Hu Jingang
Abstract This essay is concerned about screening for flavomycin producing strain by mitrous acid mutation method,which is resistant to the material produced by itself,on the isolation medium plus high concentration flavomycin after iducing mutatioan.As a results,mutant strain sg2-N2-2 was obtained,its biological titer was increased by 7.2-fold.And the colony of the mutant is different from the parent strain.
Key words flavomycin;mitrous acid mutation;strain screening

    黄霉素(Flavomycin)又名默诺霉素(Moenomycin)、黄磷酯素(Flavophospolipl)、斑伯霉素(Bambermycin),是德国赫斯特公司在20世纪70年代初期开发的一种新型抗生素类促生长剂。黄霉素至少由4个微生物活性物质组成,即默诺霉素A、B1、B2和C,其中默诺霉素A为主要成分,它是由Lindner等人于1955年从灰绿链霉素菌S.banbergiensis(斑伯氏链丝菌)的发酵产物中分离的磷酸多糖类抗生素。此种抗生素通过真菌的厌氧发酵形成,存在于菌丝体中,可通过提取分离。对纯化后的抗生素进行理化分析表明,它是一种含磷的糖酯,不同于现有的任何一种抗生素。
黄霉素具有较强杀菌作用,无抗原性和毒副作用,稳定性好,与其它添加剂不发生反应,不与其它常用抗生素产生交叉抗性,用量少,促生长效果显著,对R因子耐药菌有强烈抑制作用,特别是越来越多的畜禽需要能对R质体耐药菌起特别消除作用的药物。生态环境日益被人类所重视,不被动、植物体吸收和残留,不污染土壤,不危害生态环境的黄霉素的应用前景十分广阔。黄霉素在国外畜牧及水产养殖业中已得到普遍应用,而在我国应用刚刚起步就显示了十分广阔的应用前景。目前国内有关黄霉素的报道主要集中在使其作为饲料添加剂方面,关于黄霉素自身的诱变育种等方面的研究则较少。本研究将对黄霉素菌种诱变育种的初步结果予以报道。
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发表于 2007-1-4 01:49:39 | 显示全部楼层
S. roseoflavus also produce flavomycin, are S. roseoflavus and S. bambergiensis the same strain?
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发表于 2007-8-23 20:46:05 | 显示全部楼层
谢谢啊
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发表于 2009-8-8 11:26:22 | 显示全部楼层
三楼的这篇文章早看过了,内容很空洞,且数据很不实际,一些细节性的问题没有说出来。我做了,效果还不如我自己的实验结果。
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发表于 2010-12-17 18:54:24 | 显示全部楼层
做氨基酸缺陷型筛选的那篇文章我看了,为什么要先中间培养再青霉素处理,难道不能直接经过诱变剂处理后在基本培养基中加入青霉素处理么。

有知道的请告诉下,谢谢
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