蛋白质提取与制备

细履平沙

蛋白质提取与制备蛋白质种类很多，性质上的差异很大，既或是同类蛋白质，因选用
材料不同，使用方法差别也很大，且又处于不同的体系中，因此不可能有一个固定的程序适
用各类蛋白质的分离。但多数分离工作中的关键部分基本手段还是共同的，大部分蛋白质均
可溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液中，少数与脂类结合的蛋白质溶于乙醇、丙酮及丁醇等有
机溶剂中。因此可采用不同溶剂提取、分离及纯化蛋白质和酶。蛋白质与酶在不同溶剂中溶
解度的差异，主要取决于蛋白分子中非极性疏水基团与极性亲水基团的比例，其次取决于这
些基团的排列和偶极矩。故分子结构性质是不同蛋白质溶解差异的内因。温度、pH、离子
强度等是影响蛋白质溶解度的外界条件。提取蛋白质时常根据这些内外因素综合加以利用。
将细胞内蛋白质提取出来。并与其它不需要的物质分开。但动物材料中的蛋白质有些可溶性
的形式存在于体液（如血浆、消化硫等）中，可以不必经过提取直接进行分离。蛋白质中的
角蛋白、胶原及丝蛋白等不溶性蛋白质，只需要适当的溶剂洗去可溶性的伴随物，如脂类、
糖类以及其他可溶性蛋白质，最后剩下的就是不溶性蛋白质。这些蛋白质经细胞破碎后，用
水、稀盐酸及缓冲液等适当溶剂，将蛋白质溶解出来，再用离心法除去不溶物，即得粗提取
液。水适用于白蛋白类蛋白质的抽提。如果抽提物的pH 用适当缓冲液控制时，共稳定性及
溶解度均能增加。如球蛋白类能溶于稀盐溶液中，脂蛋白可用稀的去垢剂溶液如十二烷基硫
酸钠、洋地黄皂苷（Digitonin)溶液或有机溶剂来抽提。其它不溶于水的蛋白质通常用稀碱
溶液抽提。