发酵液中的色素在紫外分光法测定抗生素含量时的影响

灰领带

最近在做发酵液中抗生素含量测定，用紫外分光法，但是考虑到发酵液中色素的紫外吸收会对结果产生较大干扰，请问发酵液中的色素的紫外吸收峰值是多大。
我准备在214nm 处测定，请有做过相关试验的帮忙解答下。

抗生素含量的测定一般分：化学法、生物法、HPLC等，但是这几种方法在规模生产中都有弊端，化学方法比较繁琐，且对结果影响比较大，生物法比较滞后，HPLC法虽然精确，但是在生产上不能大量测样，只能鉴定，所以想用吸光法做，请大家帮忙。

蓝蓝

不同的发酵液由于原材料的不同厂家不同等色素的紫外吸收峰肯定是有所不同
用紫外分光光度测定要最大吸收峰
分别在几个不同光波长测定就能得出结论
应该不难

我们也是做抗生素的,测定效价化学方法+HPLC,基本上没有遇到什么难题.

细履平沙

与测量精度高的方法进行比较,然后进行校正.

mission

什么方法最准确, 就用什么方法, 后来无忧啊!

HPLC法虽然精确，但是在生产上不能大量测样, 此话何讲? 我们每年要筛150,000 colonies, 用的是HPLC.

向碟

kexue ：请问一下你们的色谱柱、保护柱多长时间更换一次。

灰领带

我说HPLC法在生产上不切实使因为：我们目前有24台大罐，要测效价（或含量）的罐批每个样段要有18个，平均走一个样要多少时间，一共要多长时间才能走完？可以刨除掉使用成本的因素，最后的结果已经对指导生产没有什么意义了，所以我们不采用HPLC法，想找一个更便捷的方法。
我认为，在指导生产上的测样越便捷越好。及时高效。

mission

4楼,

保护柱换得勤一些(2-3月), 色谱柱半年一换. 当然决定于你样品的干净度.

mission

5楼,
我们工厂发酵罐与你们差不多. HPLC 5分钟一个样品, 1hr, 30个样, 一天,720样.发酵罐不同步.

灰领带

我们是15分钟走一个样，一个小时才4个样，所以不切实。可能我们的水平不高，呵呵。

另外我们只是一个车间，公司对车间的成本考核非常严格。

guo

只有中后期发酵罐才测效价！