大肠杆菌表达蛋白中的溶氧控制问题？？？

zhj_27 · 发表于 2007-4-12 13:29:24

求大肠杆菌发酵表达蛋白中诱导后的溶氧控制问题？？？

该高还是低呢？

高低代谢流又分别向哪里呢？[/color]

请教高手！！！

labw · 发表于 2007-4-14 21:20:48

高啊

细履平沙 · 发表于 2007-4-15 10:48:47

溶氧高低有多大影响呢?
诱导剂如甲醇对生长有抑制作用,那么诱导后会使生长速度降低,DO升高.在表达蛋白过程中需要大量的能量,但是这时细胞需要的能量应该比诱导前少.需要的O2也会少.
因此DO在刚诱导后达到最高,然后适应了一段时间后,逐渐降低.从DO的变化可以推测出代谢情况.
我的感觉是DO控制到20%左右比较合适,它是一个安全范围,高了动力消耗大,低了对生长产生了抑制作用.总之在成本核算下,保证DO不要成为限制因素.
如果它成为限制因素了,那么代谢流会因它而发生变化.

zzgchiyi · 发表于 2007-4-15 21:14:57

溶氧问题一直是个说不清道不明的问题，一般思路是30%，但总感觉浪费了，如果低于10%，又担心怕厌氧，看来中庸之道就是20%了

wlz2006 · 发表于 2007-4-16 10:36:21

我们在做摇瓶表达时，溶氧比发酵罐中的差很多，但表达量往往比发酵罐中的高，后来分析可能是溶氧的问题，调低诱导后的溶氧，结果表达量提高了很多，但还是没有摇瓶的高。希望这个现象对你有帮助。

remmoon · 发表于 2007-4-23 12:47:38

请问你们前期溶氧大概控制多少啊？诱导后又是多少呢？？？谢谢

引用第4楼wlz2006于2007-04-16 10:36发表的“”:
我们在做摇瓶表达时，溶氧比发酵罐中的差很多，但表达量往往比发酵罐中的高，后来分析可能是溶氧的问题，调低诱导后的溶氧，结果表达量提高了很多，但还是没有摇瓶的高。希望这个现象对你有帮助。

yelove788 · 发表于 2007-6-5 15:55:56

长菌时候可以高些,产酶就要降下来,最好后期不要调节ph.有利于酶的稳定.

寻找碎玉 · 发表于 2007-6-26 15:38:18

请问 yelove788 我发酵色氨酸 pH用调吗？酸性环境是不是不利于色氨酸表达亚？

zhj_27 · 发表于 2007-6-29 01:13:53

后期找到最适的产酶pH不就得了吗

苍凉之水 · 发表于 2007-7-1 22:39:40

请问“寻找碎玉”色氨酸发酵PH最好控制在多少合适？

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