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楼主: 如果

[培养保藏] 请教一下,冻干管如何启用

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 楼主| 发表于 2007-6-16 13:29:48 | 显示全部楼层
多谢大家的帮忙,呵呵
选出高产菌株,加油加油!
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QQ80909698,QQ群651027

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发表于 2007-6-19 10:31:45 | 显示全部楼层
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建议用下列方法恢复培养CGMCC冷冻干燥的菌种。

-、安瓶管开封

  1.用浸过70%酒精的脱脂棉擦净安瓿管。

  2.用火焰将安瓿管顶端加热。

  3.滴无菌水至加热的安瓿管顶端使玻璃开裂。

  4.用挫刀或镊子敲下已开裂的安瓿管的顶端。

二、菌株恢复培养

  1.用无菌吸管,吸取0.3~0.5ml适宜的液体培养基,滴人安瓿管内,轻轻振荡,使冻于菌体溶解呈悬浮状。

  2.取0.1~0.2ml菌体悬浮液,移植于适宜的琼脂斜面/平板培养基上,剩余的菌液,注入适宜的液体培养基内,然后在建议的温度下培养。

 
三、注意事项

  1.菌种活化前,请将安瓿管保存在6一10℃的环境下。

  2.厌氧菌的培养,如无特别说明,自开封至接种完成,均需以无氧气体充填,以保持厌氧状态。

  3.某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需连续两次继代培养才能正常生长,此时请将步骤二(2)重复一次。
QQ80909698,QQ群651027,学习1群,问题请论坛交流。
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发表于 2007-6-19 11:18:51 | 显示全部楼层
楼上对问题的回答总是详详细细,认认真真!确实是我们学习的榜样!!
[fly][glow=255,red,1]总有一天[/glow]偶要成为发酵业的精英![/fly]
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发表于 2007-11-27 15:33:21 | 显示全部楼层
对四楼的这个问题,我们做实验时也讨论过,我们认为应该慢点好。我们有些菌株是甘油管在-20度下保存,解冻时先把它拿出来放到冰盒里,让它慢慢解冻,然后在放室温下继续解冻,此过程中千万不要用手去捂,否则细胞所能乘受的温差太大,很容易死掉的。
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发表于 2007-11-27 16:04:38 | 显示全部楼层
对的,同意9楼。冻干管一般常温保存,不用解冻。
裂开玻璃管直接接种,或是用无菌水混合在接种。本人推荐直接接种,这样剩下的干粉还能在除次接种失败后备用。
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社区居民

发表于 2008-3-11 17:06:17 | 显示全部楼层
  开启的时候先用75%的酒精消毒,然后在酒精灯上集中一处加热,待到一定的温度时,往加热处加少许灭菌的纯净水,用镊子轻请敲打即可.菌种活化用0.9%的生理盐水溶解好后在吸取一定量的菌液到LB培养基培养就完了.活化好后,按自己的菌种筛选方法做分离筛菌就好了.
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