重组大肠杆菌发酵遇到的问题

anlong107 · 发表于 2011-5-3 19:59:58

条件：种子培养时间为12小时，发酵周期8小时，其中诱导后培养4小时，期间监测OD,TB培养基（甘油为碳源）
遇到的问题：发酵过程中，OD变化不是很大，但是菌体收率还行。我们第一罐发酵OD值25，菌体600克左右，别的罐OD值9左右，菌体400克左右。OD突然就上不去啊，问下各位达人，为啥啊这是? 还有就是下罐菌体出现类似鼻涕状的东西，诱导后出现泡沫多，PH上升，有人说这肯定是自溶，求正解。

vei_20004 · 发表于 2011-5-3 20:07:43

感染噬菌体了，
出现鼻涕状，是轻度感染噬菌体，赶快处理吧

wuzexuan2000 · 发表于 2011-5-4 09:34:20

出现鼻涕状，明显是菌体裂解了，释放出基因组造成的，且PH值上升，泡沫增多多说明菌体裂解。有可能是菌体老化造成的，也可能是感染了噬菌体（可以把菌液原液直接涂板，看看有没有噬菌斑，很容易判断）。

发酵小孩 · 发表于 2011-5-4 14:03:56

同意上说法

fjch2005 · 发表于 2011-5-4 16:40:19

我认为可能是菌体破裂了,胞内物质逸出，特别是核酸之类，导致液体发粘。

yxchcumt · 发表于 2011-5-4 17:52:00

菌体自溶，原因是菌体老化或者感染噬菌体，先用噬菌体平板检测是否噬菌体，如果不是再确定老化原因

anlong107 · 发表于 2011-5-4 19:53:21

在发酵过程中已经加入AMP了感染噬菌体可能不是很大吧

rachelyl2009 · 发表于 2011-5-7 20:11:21

没有溶氧电极的么？如果这个过程中DO急剧上升，就是感染噬菌体了；同时你可以取样测下培养基中残糖，氨基氮的变化趋势，有助于你的判断

anlong107 · 发表于 2011-5-8 19:19:33

长知识了谢谢

layman · 发表于 2013-5-20 16:12:54

尝试用葡萄糖代替甘油，过程严格比生长速率

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