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[培养保藏] 冷冻干燥和液氮保藏那种方法好?

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发表于 2007-7-5 19:02:39 | 显示全部楼层 |阅读模式
我们公司要进行菌种保藏,冷冻干燥和液氮保藏那种方法好?
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QQ
发表于 2007-7-6 08:03:17 | 显示全部楼层
我认为是冷冻干燥好,
优点:
1,冷冻干燥后无水分,适合保藏,甚至常温下都没问题
2,冷冻干燥后菌体处于休眠状态,活力一般不会变化
3,冷冻干燥保藏时间长,一般20年之内没太大问题
4,方便,液氮是-178度保藏,需要经常补充新液氮进去,
    而且搬运也不方便!
缺点
1,冷干过程对菌体损伤比液氮大
2,要有冷干机才行,冷干机一般比较贵,

所以如果是长期的保藏菌种的话,还是冷冻干燥好,
发酵现在的课题,也是未来的方向。
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发表于 2007-7-10 16:08:51 | 显示全部楼层
我们实验室两种方法都用.具体那种好,做一下对比实验就行了.
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发表于 2007-7-16 19:48:40 | 显示全部楼层
我们使用的是液氮保存,比较不方便的是经常要补充液氮。方便的是存取比较方便!
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终身成就奖

发表于 2007-7-18 22:58:34 | 显示全部楼层
我们用冷冻干燥的更多
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发表于 2007-7-26 07:55:39 | 显示全部楼层
对于国内一般采用冻干保存菌种是一个最通用的办法。
  用液氮保存也常用,但是有很多问题,如需要补液氮,取用时的安全问题,污染问题,最主要的是储存期的问题。一般对工作种子来说,甘油保存的菌种在-70度下保存一般都不超过半年,原因是菌种活力下降,并且表达量有减少。甘油菌种在液氮条件下结果也不会好到那里去。
因此个人建议用冻干方法,-70度下保存最好。另外质粒和宿主菌也要备份,做各种准备。
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发表于 2008-1-11 18:23:09 | 显示全部楼层
各有利弊;1、液氮保存:操作简单、耗时短;但-196摄氏度条件下操作存在安全隐患,每次操作时须带面罩及防冻手套;所选用的菌液盛放瓶瓶底要用圆的,使受压均匀;若用塑料管则,要拧紧螺丝盖;室内通风要良好,防止氮气过量而发生窒息;从液氮罐内取用菌种时要注意防止破裂爆炸,因为从罐内取菌种时,液态氮体积会膨胀至680倍,爆炸力很强,要注意安全;还要注意冷冻、保存、解冻过程中以防冷冻太快、解冻太慢、氮气量不足时发生菌种的变异;此方法可以在复水时使菌体的遗传性能得以完全的表达;
2、冷冻干燥保存:冷冻保护剂须经过试验后方可使用;因为不同的保护剂对不同的菌种的稳定性作用不一样;
菌体在冻干过程中耐受负压的能力不同,抽真空过程中会发生菌体的部分死亡和变异;
升华过程中温度的升高速率会影响菌体的稳定性;
熔封或压盖的过程操作中会发生漏真空的现象;
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