问一个工程菌扩大培养方案的问题

pf821

我刚去一家公司,他们原来的做法是取10ul-70菌种接4ml试管,培养12小时,再从试管取200ul转入1瓶400mlLB中,过夜大约12小时,再把400ml转入2瓶800mlLB中3小时,再上罐.
有人说大概6小时左右菌种就能复苏了,后面的两步该是扩大的步骤,但是我感觉总的时间太长,菌体传代时间太长,我想问问复苏和扩大可不可以同时进行,比如说我直接接200ul原始菌种到400mlLB中让它过夜12小时以上,再上罐,不知道行不行?能不能帮我提点方案,谢谢?

细履平沙

我认为：活化和扩培之间的区分应该在培养基上，活化培养基应该营养更丰富，扩培的培养基应该逐渐与发酵培养基接近。

西风

让菌体传代2~3次也是一种复苏活化菌体的有效办法,有时也是必须的!

w.zam

看样子你是E.coli，直接复苏和扩培是可以的

zhanghongwei

看是那个级别的菌种。如果是工作种子（一般是甘油保存）可先在小摇瓶中培养（10毫升）活化在放大到2000毫升培养基中培养，一般对于100升发酵就够了。

如果是冻干的种子，需要在平板中活化后再进行摇瓶培养，供发酵使用。