人工化学诱变技术

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化学诱变技术是指利用一些化学物质提高生物的自然突变率，这些化学物质就叫做“化学诱变剂”。其特点有：可操作性强，简单易行；特异性较强，能诱变定位到DNA上的某些碱基；后代较易稳定遗传，一般到F3代就可稳定；应用于遗传标记，是细胞融合技术的基础。
诱变剂主要包括5类，他们的特点、机理和应用如下：
1、烷化剂：能使一些碱基烷基化，比如使鸟苷酸甲基化，影响mRNA的转录，从而使蛋白质的表达紊乱，使得蛋白质重组，而改变了性状。临床上应用此类物质作为抗癌药物，具有强烈杀伤癌细胞的作用，所以在应用在于植物上时，也要注意他的强烈杀伤性。
主要有：甲基磺酸乙酯（EMS），是最常用的诱变剂，我们曾用作真菌的遗传标记，诱变率很高。常用浓度0.05-0.5mol/L，作用时间5-60min。该物质具有强烈致癌性和挥发性，可用5%硫代硫酸钠作为终止剂和解毒剂。SIGMA公司价格：80元/25ml。
硫酸二乙酯（DMS），也很常用，但由于毒性太强，目前很少使用，作用机理和使用方法和EMS基本相同。属于剧毒品，受公安局管治。
乙烯亚胺，生产的较少，很难买到。只要用于大量诱变育种用，使用浓度：0.0001-0.1%，高度致癌性！使用时需要使用缓冲液配置。
盐酸氮芥，用于抗癌药物，可以从药店买到，但有些地方必须有主任医师的处方。
一般是针剂，稍加稀释即可使用，作用时间5-10min，可用甘氨酸作为终止剂和解毒剂。
环磷酰胺、亚硝基胍等物质也可作为诱变剂使用，但较少使用。
2、碱基类似物：分子结构类似碱基，导致DNA复制时产生错配，mRNA转录紊乱，功能蛋白重组，表型改变。该类物质毒性相对较小，但负诱变率很高，往往不易得到好的突变体。主要有：6-溴尿嘧啶、6-BudR、马来酰肼、2-氨基嘌呤等，同样属于抗癌药物，可到药店买到，稍加稀释即可使用。
3、嵌入剂：是分子生物学比较常用的一类，诱导率较高。原理是这类分子的大小正好可以嵌入碱基分子中，导致错配。最常用的：溴化乙锭（EB），高致癌性！价格较贵，但诱变率很高，是实验室常用试剂，可以到生化实际商店买到，1500元/100mg.
4、 无机化合物：比较容易得到，效果一般，危险性较小。常用：氯化锂，白色粉状，使用时配成0.1-0.5%的溶液，作用30min-2d。可到化工商店买到：120元/500克。
亚硝酸：没有现成商品，由于该物质易分解，所以现配现用。常用亚硝酸钠和盐酸制取，将亚硝酸钠配成0.01-0.1mol/L的浓度，使用时加入等浓度等体积的盐酸即可。
过氧化氢：又名双氧水，效果不好，所以很少用到。
5 其他：盐酸羟胺，一种还原剂，作用于C上，是G-C变为A-T。也较常用，可以买到。使用浓度：0.1-0.5%，作用60min-2h。较便宜。
生物碱类：如长春碱、秋水仙碱、喜树碱等。
以上的诱变剂同时又是致癌物！使用时必须小心。通常用来浸种，最好的方法是将诱变剂加到组织培养的培养基中，诱变率最高。

细履平沙

基础知识，谢谢分享。

ming918

哪种危险性最小，对链霉菌诱变效果又好呢？

chywish

现在NTG都难得到啦
我们实验室就已经没有了

只有改用亚硝酸诱变了

细履平沙

我感觉诱变不是关键,而是如何筛选.筛选模型才是最关键的.UV应该很安全,效果不好,应该是没有找到好的模型.

shaoaiyao

恩,学习的好材料,是我们考研的学生的好向导啊

shaoaiyao

希望以后大家要多发这样的文章到论坛上,供大家分享!

mission

"现在NTG都难得到啦, 我们实验室就已经没有了"

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