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[菌种选育] NTG诱变,如何知道长出的是被诱变的菌落

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发表于 2011-5-20 16:31:11 | 显示全部楼层 |阅读模式
材料:
MNNG,新买的,是黄绿色湿状固体,像冰欺凌一样。

菌种:
链霉菌X

方法:
TSB液体培养基预萌发6小时
第一次做按通用方法:2mg/mlNTG,作用2小时,结果基本没有致死率。
第二次增加到4mg/ml,并延长了作用时间到4小时,还是连20%致死率都不到

问题:
为什么我用了很高的NTG剂量,但致死率却很低?
虽然致死率很低,但能发现,作用时间越长,单菌落长出的越慢,作用2小时的孢子,比CK要晚一天才能观察到单菌落。
是不是这些变慢的单菌落是被诱变了的?

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QQ
发表于 2011-5-21 08:25:14 | 显示全部楼层
经过处理后,肯定会有作用,如果作用不可遗传,没有意义。这是一个比较粗略的诱变,关键是有一个筛选的模型,能够定向的选择合适的菌株。
欢迎关注发酵人自己的微信号: comefajiaoren
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 楼主| 发表于 2011-5-22 22:36:21 | 显示全部楼层
谢谢。现在就是没有筛选模型,也没有高通量技术,所以只能想先找出适合增加正突变效率的诱变条件,然后按照这个条件去诱变。
因为看好多文章都写了致死率和正突变率之间是有关系的,也不知道这些所谓的致死率-突变曲线实验有没有经过重复验证。
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发表于 2011-5-23 10:00:25 | 显示全部楼层
需要一定的筛选方法,直接观察的话,可以看看是否有形态突变株!!!
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