请大家多指教：基因工程菌的种子应多长时间筛选一次？

liuhu

最近发酵中遇到了表达大幅度下降的问题，今年三月发酵时使用的是2004年1月的种子，表达为57%，这周发酵使用的是2001年3月的种子（2004年1月的种子以用完），结果表达为30%多一点（因多增加营养物质使OD提高了一倍）。这次表达低是因为OD提高了一倍引起的还是因为菌种的原因？是不是菌种退化了？今年三月那次电泳杂带很少，而这次杂带很多。请大家多指教。

细履平沙

最好通过实验来证明。
我感觉是菌种问题。

kkiller

1、使用抗性平板反复筛选单菌落
2、提取质粒酶切鉴定
3、重新转化后使用

轻舞飞扬

版主的QQ是多少,能不能加为好友,在网上沟通一下?

地平线

菌种是否退化那要看你的保存条件了,有的种子可以保存9年都没什么问题,我以前也做过保存了9年的菌种发酵,对生产没有太大的影响,楼主可以考虑一下表达量与最终OD值之间的关系,如果是诱导表达的话,建议做一下菌种检测更为稳妥些.

karsen

你2001年3月的种子，在2002年生产时表达有多少，50%多还是30%多？