求教：大肠杆菌用什么方法裂解呢？

xff9178 · 发表于 2007-10-3 20:29:00

求教各位前辈，我做的是一种重组蛋白的胞内表达，目前用实验室几十升的发酵罐进行试验，但是目前试验室只有简单的超生裂解，不知道用什么方法能更有效的裂解大肠杆菌呢？多谢啦

wanying · 发表于 2007-10-30 16:15:05

一般来说都是用超声破碎的,比较简单方便.如果你的发酵体积很大的话也可以采用高压破碎方法,这个方法对你产物在温度上是个考验.

huanghua · 发表于 2007-11-9 15:15:32

高压破碎法是大规模细胞破碎的常用方法，以前高压破碎破碎头没有冷却夹套，不能控制破碎过程中的温度，会造成活性物质失活，楼主可看一下constant systems高压细胞破碎仪，他的破碎头有冷却夹套设计，可很好的控制破碎样品温度，另外进样槽的温度也可预冷却。液压系统产生高压可达40kpsi,采用固定喷嘴设计，克服了针形阀设计重现性差和易损坏的缺点。处理体积最小为0.1ml，最大可达1.1L/min.

wangpb212 · 发表于 2007-11-23 15:09:36

如果要求不高，可以试试国产的高压匀浆，我们在用。放热就加冰进去，呵呵

ainishani · 发表于 2007-12-6 11:16:44

还可以用溶胀法啊，减少对蛋白的破坏

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