种子培养基成分

blueicedu

以前做摇瓶，注重更多的是发酵的结果，所以对发酵培养基优化的比较多，对种子关注较少。最近由于要放大，要在罐上培养种子，发现我们的种子长得很慢。孢子接种17小时，似乎还没有生长的迹象。不知道放线菌的种子是本来就延迟期较长，还是因为培养基不合适造成的。种子培养基里主要是葡萄糖和酵母粉等有机氮源，我考虑是不是要加一些无机氮源，以及无机磷，也许这样可以使种子早点生长。请大家指教。

细履平沙

目前还不能确定是你的种子特性还是培养环境的问题。但是优化培养环境应该能够加速生长速率。你可以试试提高磷的含量。另外也可以提高接种量试试，或者更换氮源如加一些玉米浆。

波涛汹涌

放线菌孢子发芽的种子培养基要注意，消后培地的PH、和培养温度。我们曾于到35小时不发芽的。结果是PH偏低，调整培养基、提高生长温度后恢复正常。

blueicedu

谢谢大家。现在我们考虑可能是由于接种的孢子量少造成的。我们使用车间自制的微孔接种器，它的网眼较小，从斜面上刮下来的孢子可能有部分结团堵在网眼上，没有接入罐中，由此造成了生长缓慢。 另外想请教一下，孢子发芽是什么样的？我们现在培养了42小时，发现显微镜中仍然没有明显的菌丝，也没有孢子，但是有些染色很浅的，不规则的物质，均匀的分散在视野中，象是墙纸上的背景小花，不知道这个是不是发芽阿？

细履平沙

应该不是，一般新生菌丝染色会很深，另外应该是规则的。这样看来，不你们的问题不仅仅是接种量的问题了，而且菌体活力就低，这样很难靠接种量的提高来解决，所以应该优化培养基或改良菌种。

fish

引用第3楼blueicedu于2007-10-31 10:32发表的“”:
谢谢大家。现在我们考虑可能是由于接种的孢子量少造成的。我们使用车间自制的微孔接种器，它的网眼较小，从斜面上刮下来的孢子可能有部分结团堵在网眼上，没有接入罐中，由此造成了生长缓慢。 另外想请教一下，孢子发芽是什么样的？我们现在培养了42小时，发现显微镜中仍然没有明显的菌丝，也没有孢子，但是有些染色很浅的，不规则的物质，均匀的分散在视野中，象是墙纸上的背景小花，不知道这个是不是发芽阿？

回复:
你看到的可能是培养基,要想繁殖快点除了注意适当加大接种量外,可以考虑适当提高培养温度0.5-1度,中后期适当提高通气量.

mianchaodh

放线菌在种子培养的时候，磷能促进菌体生长，这与合成ATP等物质有关，而等到接入罐到稳定期的时候，磷又成为了菌株产素的限制因素，所以不管是种子培养基还是发酵培养基，一定要控制好磷的含量

种子长不好的另一个原因也有可能是种子活力不强，可以通过平板活化一下，会有所改善

qun1024

嗯,学习了

kanguangong

"但是有些染色很浅的，不规则的物质，均匀的分散在视野中，象是墙纸上的背景小花"
   这些东西应该是培养基中的杂质吧！也有可能载玻片不够干净。还有制片时不要烤得太厉害啦  染色剂用段时间最好过滤一下。