求助：甘油测定

erdai_001

求助：

有没有简便的测定发酵过程中甘油含量的方法啊，

有没有哪位兄台使用过啊？？？

zhouxiaohei

楼主作什么发酵，用甘油做碳源？
如果方便的话可以用气相色谱试试！

erdai_001

黑曲霉发酵，甘油不是作为碳源，
在代谢过程中会产生甘油（老外测的），但是目前我们的检测设备还不能检测到。

气相色谱没有，而且应该也不会批准购买，
好像QA买了HPLC，不知道能不能测，如何测

cuijianli410

液相可以的，我们就用液相测的，需要配个标样

细履平沙

好象看文献有用试剂盒的.楼主找找看.

寂靜無聲

可以問sigma的業務,他們有,
大約要1000元左右(含標準品),
可以參考一下

ferment

液相色谱需要使用视差监测器，气相色谱可以测到。可以用化学法高碘酸钠法测定。

hechuan1

滴定法也可以，就是不知是否适合你

卓尔不凡

我用的是酶法，简单、快速、准确，具体方法如下：
一、原理：
甘油在甘油激酶作用下与三磷酸腺苷生成3－磷酸甘油和二磷酸腺苷。3－磷酸甘油被甘油磷酸氧化酶氧化成磷酸二羟丙酮和过氧化氢，后者在氧化物酶催化下与4－氯酚和4－氨基安替吡啉缩合成红色醌亚胺化合物，此化合物在505nm波长处有吸收峰，测定其吸光度计算出甘油三脂含量。
二、操作步骤：
试剂    空白管    标准管    测定管
样品    －    －    2ul
标准液    －    2ul    －
酶工作液    200ul    200ul    200ul
分别将各管混匀置37℃，水浴中保温15min，取出并冷至室温，使用酶标仪于波长505nm比色，以空白管校“0”点，读取各管吸光度。（实际选用波长492nm进行测定），与505nm测定结果误差不超过5％。
计算公式：
甘油含量(mmol/L)=
测量范围0~11.3mmol/L(0~1040mg/L)

yangyu

用甘油三脂试剂盒，简单快速