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[培养保藏] 如何让斜面的孢子长得更好

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发表于 2008-1-2 10:19:06 | 显示全部楼层 |阅读模式
我们发酵的菌种是链霉菌的一种。总是觉得茄子瓶上的孢子长得比较稀。想请教各位两个问题:1、斜面上的孢子长得疏密程度多少为宜?生产上使用茄子瓶前是不是要先计孢子数的,显微镜下能直接看到并计数吗?2、我们的孢子在试管斜面培养通常比茄子瓶斜面培养长得密集。可能是接种工具的问题,因为茄子瓶的面积比较大,不容易涂抹均匀,长出来的菌落就很稀。不知道有什么比接种铲更适合的工具来涂茄子瓶斜面?

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发表于 2008-1-2 15:05:44 | 显示全部楼层
用孢子悬液可以涂布均匀
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发表于 2008-1-3 16:28:16 | 显示全部楼层
涂布容易染菌,长的不好多长几天,或者改进下培养基看看!
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发表于 2008-1-3 22:06:31 | 显示全部楼层
我觉得与湿度有关,茄子瓶体积大,瓶壁上凝聚了大量水珠,一般越靠近瓶底,生长的就越不好。多培养两天,然后再在冰箱里放两天,孢子就比较厚了。
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发表于 2008-1-11 17:59:38 | 显示全部楼层
1、接种工具可以用:接种铲、接种环、接种棒等;
2、斜面生长稀密,与接种量多少有关,冷冻管的话与稀释量有关;砂土管的话与砂土中孢子量的多少、砂土的是否掺匀、砂土管抽真空时真空度、时间的控制有关;空白斜面中水量的多少有关;水量多菌种接进去扎根不深,并且会随水而游动造成斜面稀密不一;
3、生产上使用茄形瓶即生产斜面时,显微镜计数作用不大。因为普通光学显微镜下做的血球板计数,所看到的是活细胞和死细胞的总数,计数结果并不能直接反应出斜面中活细胞的实际数量,所以计数意义不大;
4、在接种量、菌种活力统一的情况下斜面生长稀密,还与斜面中培养基的装量、斜面的铺制方式、培养室内的温湿度的控制、培养室温度均一性的良好情况有关;
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 楼主| 发表于 2008-4-15 12:23:30 | 显示全部楼层
各位说的都很有道理,谢谢大家了。
我还有两个问题想问一下,
1、在生产中用母瓶传子瓶,具体是怎么操作的呢?
   我听到有些师傅讲,但还不是很明白。是不是把首先把单菌落的菌种接到很多小试管上,长好了就是母瓶。每次使用时取出一支,加入少量无菌水,打散孢子,然后用接种环涂布到茄子瓶上培养。如果不打散孢子,直接孢子刮下来涂布行吗?
2、所谓菌种的活力是如何测定的?是不是稀释一定倍数以后涂布在平板上计菌落数?
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发表于 2008-10-3 21:56:37 | 显示全部楼层
所谓 母瓶和子瓶是没有特定的定义的,你说的可以认为是,我们做的母瓶和子瓶是三角瓶,只要是一母一子就可以认为是母瓶和子瓶了,从斜面刮去孢子传茄瓶是可以的不过量的掌握不好控制,最好是用菌悬液涂布;孢子活力测定你说的方法我认为有道理,不过在我看来有这么两点应该更好:镜鉴孢子形态及染色,再有就是接种子瓶,通过种子质量来反映菌种活力,因为就算是平板生长再好却不适宜生产还是不行的,现在不是流行一种观点吗,平板上小的菌落不见得是低产的
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发表于 2008-12-18 11:42:57 | 显示全部楼层
最好是每次根据经验看接多大的合适,这个可由后面的菌种计数来丰富经验
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发表于 2008-12-25 12:44:45 | 显示全部楼层
用吸管接种,既可以控制接种量,又可以涂布均匀
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