有没有人开过原种啊，要准备些什么东西，要注意些什么

lryt008

现在我们菌种要开一支原种出来分离，因为以前没接触过，所以特向高手请教要注意些什么，准备些什么

细履平沙

先要活化一次,然后再划线分离单菌落.准备上需要的器具和培养基.

xiaqingmei

不知道你的原种是如何保存的？是安瓿管吗？是不是冻干的？

lm-sz

如果原来是在液氮冷冻保存的菌种，则先复苏后取少许在准备好的平皿中培养分离，在操作时切记注意防止污染。

halfz

培养基最好多准备几种，尤其你们原来培养该菌种的培养基多准备些，涂布时多涂几个稀释度的。另外可能刚开始时长势不是很好，不要放弃，再转接几次就好了。

kanguangong

我看台湾菌种保藏中心提供的资料大致如下:
    1:用70%的酒精擦安瓿管(他们的管有点差别 形状是圆柱状 两层;夹层放硅胶 里面管未封是用滤纸团塞住)
   2:在酒精灯烧1分钟左右 滴无菌水----让管炸开
   3:用无菌镊子 嵌出滤纸
   4:加无菌水或培养基0.3---0.5ML让其混匀(开霉菌 酵母用无菌水.霉菌菌种与无菌水混匀后再移入5ML无菌水中震荡  约30分钟;开细菌用培养基.它每种菌都提供培养基成分)
     5:做剃度了
    我觉得既然是做菌种  准备工作要做好
   比如实验室消毒  器材灭菌要切底  操作要规范
   对了还要多安排两个剃度 要不全长成一片也郁闷

liwen.tan

CGMCC提供的方法如下，请参考
1，2同5楼
3.用无菌吸管，吸取0.3-0.4ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。
4.取约0.2ml菌体悬浮液，移植于指定的琼脂斜面/平板培养基上，剩余的菌液，注入指定的液体培养基内（3-4ml），然后在建议的温度下培养。
另外还得注意：1.菌种活化前，将安瓿管保存在6-10度的环境下；
2.厌氧菌的培养，如果没有特别说明，从开封至接种完成，均需以无氧气体充填，以保持厌氧状态；
3.某些菌经过冷冻干燥保藏后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长。