菌不见了？

意兴盎然

今天准备接一批新菌种，做好前期的准备工作后涂片看看，  咦，  摇瓶里啥也没有，可是在摇床上培养50小时了、、、这个摇瓶是用一支保存一年的试管斜面接的，接完试管的涂片还在，明明有芽胞的、、、不可能没接进去啊，这个菌接一点点都会疯长的、、、摇瓶培养基是前几天刚配的、、、
不知道各位做菌种的同行有没有类似的经历，帮忙分析分析吧。

细履平沙

培养基配错没有，培养环境是不是发生过变化？斜面一般保存期不能超过3个月，一般要用新鲜的。你再检查一下斜面，菌体生长情况。

lingble

你如果仅仅做的是涂片显微镜检，那么看到的菌体是无法保证存活的，只能说那个菌体是存在的。
这个实验的失误在于事先没有检查斜面菌株的活性就直接接入。原因也很简单斜面保存时间过长，引起活菌数下降，且接种量过低。
应该斜面转接平板确定活力后，再接种。

halfz

斜面菌种死亡了吧，保存时间太长了，尤其在4度冰箱里，很容易出现这种情况的。芽胞估计已经丧失萌发能力了，建议长时间保存用冻干管或者甘油管冷冻保存。

意兴盎然

象2楼师傅所说的，倒是提醒了我，我们一般都没有接平板鉴定菌种的活性的，这样不是很复杂，不会又传代培养了？会不会带来染菌或者变异的风险了？我看做一个平板的追踪鉴定还是可以的，另外对于这种情况我感觉还是要备份，总不至于这个试管不行，下次还用这个，不管三七二十一，不到南墙不回头吧？
总结经验，还是要从来。首先设备上我们认为，此次使用的摇床有问题，正常条件下在该摇床培养长芽胞时间耗时长，其次普通的试管在冰箱保存的时间一年了，表面已经很干，菌种的活力肯定有点问题。针对这两点，我们更换了摇床，另外接了一支保存4月的试管斜面菌种与之对照，从这二者中看哪个更好。涂片镜检的结果出来了，一年的不如4月的芽胞多，保存4月的菌苔含水分高。
这次看结果怎么样了，着急啊

ferment

这种异常结果最简单的方法就是再重新做一遍