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看我们如何捉虫吧
我们实验室使用的发酵罐是国强生产的。在一次实验中发现染了芽孢杆菌，当时没有在意，认为可能是补加了菌体生长抑制剂后，导致了发酵菌丝没有生长，使杂菌有机可乘，结果下一次在延长了灭菌时间后，还是在24小时镜检发现了杆菌。
这一次才让我们紧张起来。开始着手解决这个问题，首先更换了过滤器，因为在南方此时空气温度大，很容易使空气滤芯受潮失效。另外在放罐时，用清洁剂将罐内的各个地方处理干净了，只有空气过滤器没有办法进行检查，这也是我们首先怀疑空气过滤系统的原因。取出罐的档板和pH、DO传感器。然后配制好稀料，按照正常的灭菌方法进行灭菌。
但是不幸的是，24小时后又染菌了。引用请注明出处(from www.fajiaoren.com)
急呀！怎么办，难道还是空气过滤器的问题吗？后来我们在空气过滤器消好后，吹干10分钟，然后用一个可靠的方法对过滤器的无菌情况进行了检查，这样排除了空气污染的问题。之后，我们又拆去附属配件，重新灭菌，结果在48小时内染菌了。
现在排除了空气系统，罐内又没有其它的附属设施，之前对夹套已经进行了检测，没有发现有渗漏现象。我们几乎“绝望”了，怎么办？还是静下心来，进行细致的观察和分析吧！
首先认为可能是一个阀门的问题.这个阀门是空气过滤器的蒸汽阀门,因为它是一个抗生素级的隔膜阀,过滤器灭菌完毕后,由于温度高,导致这个阀门不能关紧.由于蒸汽压力高于空气压力,在空气进罐后，使蒸汽从这里进入到空气系统.开始时,蒸汽中含有大量的水分,这些水分到达了空气过滤介质,导致了过滤介质的排列发生改变,使空气中的细菌进到罐中.那么为什么前面的方法却证明空气系统没有问题呢？这可能是因为检查不是在吹干后立即执行，而是等了一段之后，这就错过了出杂菌的时机，总之这样解释应该有一点道理吧！
其次认为可能是搅拌轴的问题，因为在放罐时总能在轴与罐盖的接口的弹簧处，吹出许多发罐残渣，这些发酵液可能是灭菌时泡沫带的培养基进到了此处，这个可能是死角。
这样我们采取了以下的措施：引用请注明出处(from www.fajiaoren.com)
1、在灭菌完毕立即关闭蒸汽发生器并关闭此罐的蒸汽总阀门，防止蒸汽再进入空气系统，另外，在降温过程中逐渐关紧那个隔膜阀。
2、将罐的体积从10L降低到7L。不足的体积在消后用无菌水补足。
3、用保温材料将传感器罐外区域包裹，提高这个区域的温度。
4、在灭菌过程控制泡沫，防止泡沫出现太多。
5、将灭菌时间20分钟延长至30分钟空气过滤器与以前相同要吹干10分钟。
采取了这些措施后，我们在希望中等待了24小时，镜检没有发现问题；48小时之后也没有出现染菌。
什么是最主要的原因呢，是隔膜阀还是培养基体积或是其它呢？目前还不太确定。
但是无论如何我们解决了问题。哈哈哈哈，我们太高兴了。愿与大家分享我们的经验和快乐！
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