ygl510 发表于 2010-7-17 21:11:20

大罐连续多批染菌,基本为芽孢和酵母时间不定,重消空气过滤器,碱水煮罐,补料管道试漏发现问题,重新进罐仍染菌,最后发现未经处理的移种管道法兰有裂缝,更换法兰并将垫片更换为硅胶垫,问题解决。

liu4253924 发表于 2010-8-8 22:59:55

蒸汽系统也应该注意!
大罐连续几批染菌,种子没有染菌的迹象。做中试的空培,在34h发现杂菌;罐体没有问题,认为是滤芯的问题。全部换成新的滤芯,中试的空培不在染菌,但大罐的空培还有杂菌。最后觉得蒸汽系统可能有问题,消空气滤芯蒸汽管路上的蒸汽滤芯拆下来一看,四个滤芯有三个已经瘪了、破了。换上新的以后,一切正常。后来追查原因是有一次蒸汽减压阀坏了,蒸汽压力过大,把蒸汽滤芯压瘪了。

008chf 发表于 2010-8-9 10:44:32

引用第41楼liu4253924于2010-08-08 22:59发表的:
蒸汽系统也应该注意!
大罐连续几批染菌,种子没有染菌的迹象。做中试的空培,在34h发现杂菌;罐体没有问题,认为是滤芯的问题。全部换成新的滤芯,中试的空培不在染菌,但大罐的空培还有杂菌。最后觉得蒸汽系统可能有问题,消空气滤芯蒸汽管路上的蒸汽滤芯拆下来一看,四个滤芯有三个已经瘪了、破了。换上新的以后,一切正常。后来追查原因是有一次蒸汽减压阀坏了,蒸汽压力过大,把蒸汽滤芯压瘪了。
蒸汽过滤器坏,个人认为不应该对无菌有很大影响啊,蒸汽是无菌的啊,除非是其中的颗粒物影响了其他罚门的密闭性。

lyzwolf 发表于 2010-8-10 15:33:52

精过滤器的滤芯使用寿命我认为和以下几个方面有关
1.产品的本身的质量,这个很重要,要选择大厂生产的,质量好,价钱也公道。
2.做好空气的预处理工作,选择好的空气预过滤设备能大大的提高精过滤器的使用寿命。
3.空气进入预过滤器之前一定要有一个除水除尘,将灰尘和水分除去。
4.选择无油的空压机。
5.有空气除湿系统,保证水分不在过滤器里凝结。
6.过滤器的空消次数不宜太多,如果正常的话一年4次够了。
7.空气系统可以做的大一点,比如你的空气需要100方/min ,你也以按照200方/min设计系统。空压机选2台(轮休),过滤器也选的大一点,这样空气系统就基本没什么大问题

zcg0216 发表于 2010-9-1 11:19:45

噬菌体问题
1、现象
菌种摇瓶正常(杂菌平板、噬菌体平板无异常)、小试种子罐和发酵罐均正常、大罐种子罐正常(不移种连续培养正常),大罐发酵移种后5小时以内OD先升后降,平板检查明显噬菌斑现象,三个大罐都出现相同情况
2、分析
小试和种子罐正常,排除种子问题;大罐种子正常,排除补料、空气和蒸汽系统;重点分析滤芯、进罐阀,罐内死角问题
3、结果
滤芯全部换新的,系统彻底灭菌,停产一周每天消毒,下罐检查排除死角。开始后现象一样,染菌继续,现在准备更换菌种,正在进行中。。。
后期如有解决办法,会及时分享,也希望各位同仁提供解决思路!!!

zcg0216 发表于 2010-9-3 18:03:45

小试新菌种分纯验证完成,明天准备上大罐,今天又一次下罐排查跑冒滴漏,空气系统消毒灭菌,但愿明天能够一次成功!
但是真正的原因仍未找着,还需继续查找

zcg0216 发表于 2010-9-30 21:40:37

引用第44楼zcg0216于2010-09-01 11:19发表的:
噬菌体问题
1、现象
菌种摇瓶正常(杂菌平板、噬菌体平板无异常)、小试种子罐和发酵罐均正常、大罐种子罐正常(不移种连续培养正常),大罐发酵移种后5小时以内OD先升后降,平板检查明显噬菌斑现象,三个大罐都出现相同情况
2、分析
小试和种子罐正常,排除种子问题;大罐种子正常,排除补料、空气和蒸汽系统;重点分析滤芯、进罐阀,罐内死角问题
.......
问题终于解决了,噬菌体还是需要这样处理的:
1、停产1个月,每天坚持用0.5甲醛车间喷洒消毒,用漂白粉厂区消毒;
2、采风口加高至60米,增加空气预过滤;
3、从采风口开始加入甲醛,空压机连续吹气10h,通过管道和各个罐子,小排全部打开;
4、之后用蒸汽消毒全部空气系统10h;
5、尾气用碱水和蒸汽灭活后排放,杜绝活菌排放;
这样处理后,至今没有出现噬菌体污染现象。

火舞 发表于 2010-10-20 19:49:07

1现象
最近发酵罐在种后9h出现染杆菌,【3批】ph下降厉害,
经过排查设备无问题,空气,蒸汽,人员操作等无问题。
怀疑灭菌不彻底,查找原料,发现更换了一种重要原料,
镜检有杆菌,重新修订消毒温度,未在出现染菌

linlongszh 发表于 2010-12-25 17:39:59

单罐连续几个月染菌,菌型单一,都是在100小时左右镜检出现。
采取的处理措施
1.、更换预,精过滤器3批,没效果
2、打加压水查蛇管2次,没查出漏点
3、罐内蛇管夹子,联轴器,搅拌叶,挡板等换新的,没效果
4、罐内的爬梯,腐蚀严重,开始没在意,最后更换的新的爬梯,该罐就不在染菌了

nmwbmh 发表于 2011-3-22 19:06:55

联轴器导致的染菌
1现象 10T发酵罐,连续3次每次48小时左右染杆菌

2分析每次补料和加消泡剂都是40小时左右
就开始盘查补料管道及补料罐 都没发现异常,下罐检查蛇管,更换罐体一阀都没效果
最后发现联轴器内结块严重。因为联轴器在8T的位置,装料只装7T,40多小时起泡沫,淹没联轴器导致染菌
3处理   松开联轴器螺丝,清洗联轴器,罐子正常

4结论   思路没打开,只吊死在一棵树上
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