解决发酵染菌的真实案例（跟帖补充查找染菌完整过程者1

ygl510 · 发表于 2010-7-17 21:11:20

大罐连续多批染菌，基本为芽孢和酵母时间不定，重消空气过滤器，碱水煮罐，补料管道试漏发现问题，重新进罐仍染菌，最后发现未经处理的移种管道法兰有裂缝，更换法兰并将垫片更换为硅胶垫，问题解决。

liu4253924 · 发表于 2010-8-8 22:59:55

蒸汽系统也应该注意！
大罐连续几批染菌，种子没有染菌的迹象。做中试的空培，在34h发现杂菌；罐体没有问题，认为是滤芯的问题。全部换成新的滤芯，中试的空培不在染菌，但大罐的空培还有杂菌。最后觉得蒸汽系统可能有问题，消空气滤芯蒸汽管路上的蒸汽滤芯拆下来一看，四个滤芯有三个已经瘪了、破了。换上新的以后，一切正常。后来追查原因是有一次蒸汽减压阀坏了，蒸汽压力过大，把蒸汽滤芯压瘪了。

008chf · 发表于 2010-8-9 10:44:32

引用第41楼liu4253924于2010-08-08 22:59发表的 :
蒸汽系统也应该注意！
大罐连续几批染菌，种子没有染菌的迹象。做中试的空培，在34h发现杂菌；罐体没有问题，认为是滤芯的问题。全部换成新的滤芯，中试的空培不在染菌，但大罐的空培还有杂菌。最后觉得蒸汽系统可能有问题，消空气滤芯蒸汽管路上的蒸汽滤芯拆下来一看，四个滤芯有三个已经瘪了、破了。换上新的以后，一切正常。后来追查原因是有一次蒸汽减压阀坏了，蒸汽压力过大，把蒸汽滤芯压瘪了。

蒸汽过滤器坏，个人认为不应该对无菌有很大影响啊，蒸汽是无菌的啊，除非是其中的颗粒物影响了其他罚门的密闭性。

lyzwolf · 发表于 2010-8-10 15:33:52

精过滤器的滤芯使用寿命我认为和以下几个方面有关
1.产品的本身的质量，这个很重要，要选择大厂生产的，质量好，价钱也公道。
2.做好空气的预处理工作，选择好的空气预过滤设备能大大的提高精过滤器的使用寿命。
3.空气进入预过滤器之前一定要有一个除水除尘，将灰尘和水分除去。
4.选择无油的空压机。
5.有空气除湿系统，保证水分不在过滤器里凝结。
6.过滤器的空消次数不宜太多，如果正常的话一年4次够了。
7.空气系统可以做的大一点，比如你的空气需要100方/min ，你也以按照200方/min设计系统。空压机选2台（轮休），过滤器也选的大一点，这样空气系统就基本没什么大问题

zcg0216 · 发表于 2010-9-1 11:19:45

噬菌体问题
1、现象
菌种摇瓶正常（杂菌平板、噬菌体平板无异常）、小试种子罐和发酵罐均正常、大罐种子罐正常（不移种连续培养正常），大罐发酵移种后5小时以内OD先升后降，平板检查明显噬菌斑现象，三个大罐都出现相同情况
2、分析
小试和种子罐正常，排除种子问题；大罐种子正常，排除补料、空气和蒸汽系统；重点分析滤芯、进罐阀，罐内死角问题
3、结果
滤芯全部换新的，系统彻底灭菌，停产一周每天消毒，下罐检查排除死角。开始后现象一样，染菌继续，现在准备更换菌种，正在进行中。。。
后期如有解决办法，会及时分享，也希望各位同仁提供解决思路！！！

zcg0216 · 发表于 2010-9-3 18:03:45

小试新菌种分纯验证完成，明天准备上大罐，今天又一次下罐排查跑冒滴漏，空气系统消毒灭菌，但愿明天能够一次成功！
但是真正的原因仍未找着，还需继续查找

zcg0216 · 发表于 2010-9-30 21:40:37

引用第44楼zcg0216于2010-09-01 11:19发表的 :
噬菌体问题
1、现象
菌种摇瓶正常（杂菌平板、噬菌体平板无异常）、小试种子罐和发酵罐均正常、大罐种子罐正常（不移种连续培养正常），大罐发酵移种后5小时以内OD先升后降，平板检查明显噬菌斑现象，三个大罐都出现相同情况
2、分析
小试和种子罐正常，排除种子问题；大罐种子正常，排除补料、空气和蒸汽系统；重点分析滤芯、进罐阀，罐内死角问题
.......

问题终于解决了，噬菌体还是需要这样处理的：
1、停产1个月，每天坚持用0.5甲醛车间喷洒消毒，用漂白粉厂区消毒；
2、采风口加高至60米，增加空气预过滤；
3、从采风口开始加入甲醛，空压机连续吹气10h，通过管道和各个罐子，小排全部打开；
4、之后用蒸汽消毒全部空气系统10h；
5、尾气用碱水和蒸汽灭活后排放，杜绝活菌排放；
这样处理后，至今没有出现噬菌体污染现象。

火舞 · 发表于 2010-10-20 19:49:07

1现象
最近发酵罐在种后9h出现染杆菌，【3批】ph下降厉害，
经过排查设备无问题，空气，蒸汽，人员操作等无问题。
怀疑灭菌不彻底，查找原料，发现更换了一种重要原料，
镜检有杆菌，重新修订消毒温度，未在出现染菌

linlongszh · 发表于 2010-12-25 17:39:59

单罐连续几个月染菌，菌型单一，都是在100小时左右镜检出现。
采取的处理措施
1.、更换预，精过滤器3批，没效果
2、打加压水查蛇管2次，没查出漏点
3、罐内蛇管夹子，联轴器，搅拌叶，挡板等换新的，没效果
4、罐内的爬梯，腐蚀严重，开始没在意，最后更换的新的爬梯，该罐就不在染菌了

nmwbmh · 发表于 2011-3-22 19:06:55

联轴器导致的染菌
1现象 10T发酵罐，连续3次每次48小时左右染杆菌

2分析每次补料和加消泡剂都是40小时左右
就开始盘查补料管道及补料罐都没发现异常，下罐检查蛇管，更换罐体一阀都没效果
最后发现联轴器内结块严重。因为联轴器在8T的位置，装料只装7T，40多小时起泡沫，淹没联轴器导致染菌
3处理松开联轴器螺丝，清洗联轴器，罐子正常

4结论思路没打开，只吊死在一棵树上

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