最近做发酵遇到一个很奇怪的现象

yinqiang1984

    我用的经过改造后的菌株进行摇瓶发酵和5l罐，50l罐的发酵，发现在300ml摇瓶中的产物量很大，生长也不错，看不到明显的延迟期。用同样的培养基在5l罐上进行发酵，发现菌体出现了10个小时的延迟期，而到了50l的大罐上，也是10个小时的延迟期，OD变化和最终OD值与5l罐基本一致，但产物却出奇的少，不到小罐的三分之一。后来又换了1L的大摇瓶做发酵，发现菌体出现了6个小时的延迟期，但产量要比大罐高。这究竟是怎么回事？接种量都是按10%接种。

zxx5389236

发酵过程的放大是很深的学问，需要多方面考虑，比如你的接种量，大罐可以增大些，再如搅拌转速，大罐通常要小一些，以减少剪切力对菌体的伤害。多看看相关的书吧！

yinqiang1984

我从300ml小摇瓶到1L大摇瓶都会出现这种状况

细履平沙

溶氧是不是一个影响因素呢?摇瓶越小,应该溶氧越差.在发酵罐上溶氧条件应该比摇瓶中好.而且剪切力也不容忽视.所以楼主可以设计试验进行验证.

kingrijiu

这样的现象在生产中可能也有相关的现象，比较倾向于四楼的观点，我这边他们厂里有这种现象，如果接种量不大的话， 前期加风量太快的话，种子会长的很慢。可以不固定摇床的转速试试看。但是对于罐上的话就感觉和摇品有一定的相似性，但是这种放大可能影响的因素比较多。延迟期增加的现象不好说具体那个因素是主要的。

niuzhili1984

你的发酵产物是有效价吗,这个问题就是发酵工艺放大的问题,你可以从空气流量、温度、搅拌转速、罐压的因素去考虑，前期肯定是一个经验的摸索过程。

tfheb

摇瓶里的种子传代次数，是不是比罐上要少呢？有的菌种传代次数对发酵是有影响的！

topmit

在小规模反应器上做的工作还很不足。
因为你直接使用了摇瓶规模的发酵培养基。
而反应器上的操作条件呢？DO, pH, 剪切，甚至是罐压。

研究放大，不是简单意义上的规模放大，而是研究三传一反在不同规模上的差异，寻找到放大的关键性制约因素。

所以，楼主的放大之路，还有些距离。
如果一味的进行规模上的验证，是达不到放大效果的。

yinqiang1984

我做摇瓶种子和做发酵罐种子是一样的级数。还有楼上，我在不同的摇瓶中做都会有明显的延迟期增长的现象，我的种子在6h,8h,10h,12h接入大摇瓶，依然出现很长的延迟期，在罐上的延迟期更长。这个菌株生长比较慢，糖耗也比较慢，但由于种种原因一定要早转种，往往是在种子OD1到2之间就转发酵了，转大摇瓶进行发酵也是采取10%的接种量，如果等OD再高一些才转，那延迟期更长，效果更差，这个菌株本身所具有的特点不允许它在对数生长期中后期转种，必须要在中前期。以前别人用这个菌株做过，采取过低于10%的接种量，比如1%，2%，5%，但延迟期和按10%接种的相比没有任何变化。

yinqiang1984

这个菌株的超长延迟期始终无法改变，而且在摇瓶上剧烈产酸，在对数生长期末和稳定期，2h之内PH就会从7.2下降至5.5，4hPH就会下降到4.6，菌株已经无法生长，所以必须至少每2h调节一次ph，做这样的东西我都快发疯了，尤其是摇瓶多的时候，调节PH的时间就要占用半个小时还要多。