求助：枯草的平板计数老是张成一片，无法计数

zhoujvchuan

谢谢各位，但是现在我感觉大家没有说到点子上，据我说知现在不止是我遇到这个问题，菌数高了后计数就比较困难，各家生产枯草的单位好像都有这个问题，希望有这方面经验的人多与大家分享

细履平沙

假定：这样的菌只有达到一定浓度才会分泌生长因子，如果浓度达不到就不能分泌，因此菌体也不生长．如果是这样，你可以在平板上涂一些高浓度菌的离心上清液（注意无菌操作和在对数生长前期时的上清液）．然后再涂布低浓度的菌，同时也进行对照，如果对照不长，涂有生长因子的平板长，那就是我的假设正确．

荆棘鸟

引用第3楼lt8059于2007-06-03 19:29发表的“”:
说明数量多啊，好事。多稀释几倍吧。李涛

我不同意这个说法  我之前也遇到过这种情况但不是 说明菌数高的无法计而是 扩散生长了

fenggou82

有没有污染呀

hesitates

这是由于菌落扩散所至，由于菌落扩散而使整个菌落连成一片而无法计数，这需要注意培养时间和培养基的组成，并注意下培养基的水分。

意兴盎然

恐怕是检测平板的水分太多了，你试试用倒好的平板无菌条件下放置两天后做（检测中心的做法），或者你试试在超净工作台吹吹，同时做空白。

lishan

1.可以考虑加0.25%麦芽糖，作为一种附加碳源，提供特殊的营养，还可抑制芽孢的形成；
2.考虑十字划线接种技术。

softknife

在培养过程中多观察几次，看是否生长扩散造成还是起其他原因。

hoverx

问题估计出在平板上，我们也经历过，当天倒当天用，平板内水分太多，涂完板倒置后就像有水在流动，最后菌都长成一片。平板倒完后要急着用可在超净台内打开盖、开紫外、开风机吹上十几分钟，或是放在出气孔上，不用打开盖，开风机吹也能吹干。如果不急着用，就可以在培养箱内干燥一天，同时能够确保无杂菌。

西风

我也做过枯草，但是我们是用肉汤培养基倾倒平板，而不是平板涂布，培养72小时，菌数也上百亿了，很好计数的！