有点疑问，冷冻保存究竟应该速冻，缓冻？复苏的时候升温

chzhi163 · 发表于 2007-7-27 11:27:34

个人认为快降快升,快降避免小冰晶的成长变大损伤细胞,快升速溶,但要注意度的问题!

nihaowoyehao · 发表于 2007-10-22 17:03:39

看来大家所用的方法也各不同，都是按照各自实验室的习惯进行。
可能不同菌种需要不同方法。通常大家只关心冻存的菌能否复苏，而对其对发酵单位影响及稳定性影响没有太多的关注。

leehe710 · 发表于 2007-12-8 02:11:09

逐渐冷冻降温,复苏速升温

leehe710 · 发表于 2007-12-8 02:11:45

逐渐冷冻降温,复苏速升温

leehe710 · 发表于 2007-12-8 02:11:57

逐渐冷冻降温,复苏速升温

lwq1975 · 发表于 2007-12-9 10:02:48

论坛斑竹说得很对，试验，我是做放线菌发酵的，我们对液氮和超低温冰箱的菌种保藏条件都进行了详细的实验，最终的保存条件和文献的报道有很大的差别，我们发现不同的温度的冷冻时间和溶冰时间对于菌种的生产水平和孢子存活率是相差很大的。

wuyapeng1215 · 发表于 2007-12-10 10:01:02

我强烈建议用缓慢冷冻法，就我做的一些微生物，特别是一些细菌，我一般从-20那出来都是先在4度下解冻再到室温。有时候不注意，直接解冻有些微生物的活性变化跟大，次数多后严重的会死亡！

冰透雪 · 发表于 2007-12-18 11:20:33

楼上的,你好!

   请教一下,你说的"一些细菌，我一般从-20那出来都是先在4度下解冻再到室温",如果我的细菌是保存在斜面上的,那样做对菌体的伤害大吗?
   因为我们这里停电两天,所以我把斜面上的菌放在了-20度左右的冰箱中,现在又把它放在了4度冰箱中,我不知道是不是菌大都都死了呢?
   急需!谢谢!!!!!!

halfz · 发表于 2007-12-19 09:00:48

我看主要是看你的斜面在这段时间有没有形成冰块，要是形成冰块了就有可能被冻死了。既然这样就赶紧转接吧。时间拖的越长死亡的越多。
另外冷冻保存时主要看你的保护剂。而且和你所用菌有关，一般阳性菌比阴性菌扛冷冻些。我当时使用的是阳性的乳酸菌，直接加好保护剂后放置－20℃冰箱保存。解冻时采用37℃左右的温水解冻，这主要是迅速通过冰晶区，防止细胞内地冰晶将细胞膜刺穿而导致菌体死亡。当时的效果很好。你也可以试试。但主要看你的菌株特性，都需要你自己去总结的。

大漠孤烟 · 发表于 2008-1-11 18:34:43

我认为冷冻过程中采用慢冻、解冻时采用快速升温为宜。
冷冻过程中要慢冻为好。因为在速冻时细胞内会形成冰晶冻结，形成的冰晶会刺伤细胞；快速复苏可避免冰晶颗粒由低温到升温过程中发生冰晶增大现象所造成的细胞死亡，若在室温缓慢复温会影响细胞的存活率；一般复苏时放在40～50摄氏度的烧杯内，轻轻晃动，以使复苏加快。

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