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楼主: landwind

[培养保藏] 求救!菌种复壮的问题

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准☆☆☆

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发表于 2009-11-13 13:18:03 | 显示全部楼层
引用第5楼vb_5于2008-10-18 12:03发表的  :
1、菌种最有效的保存办法:采用冻干保存
2、根据你提供的菌种退化速度,第六代应该复壮
3、复壮的常用办法:稀释活化复壮
   活化方法:配制一定体积的0.25%(m/v)的磷酸二氢钾、0.75%(m/v)的磷酸氢二钾缓冲液,在5支50ml试管中(内预放3~5颗玻璃珠)各量入10、9、9、9、9ml(蒸汽灭菌),然后挑取斜面菌种中的菌落放入10ml试管,振荡后吸取1mL转移到9ml试管,依次稀释4个梯度,最后各吸取0.2ml进行平板涂布,在28℃的培养箱中培养48——72小时,挑取较好的单菌落转接到试管或茄子瓶斜面培养基培养72~96小时,冷藏保藏(以上操作均需在无菌状态下进行)。

对于稀释液,有人用矿泉水,有人用蒸馏水,也有用生理盐水,(有没有用自来水的?)上面这个用磷酸缓冲液。一般地,用哪种好一些?
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发表于 2010-4-26 16:04:43 | 显示全部楼层
菌种复壮应间隔期短一点
我们采用液体石蜡封存的
半年复壮一次
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