菌种诱变

halfz

一般诱变后尽量采用某种筛选方法在涂布的平板上进行快速筛选，例如转基因菌株筛选就是在含有抗生素的平板上筛选，一个平板能涂布大概0.5～1ml的菌液，得到的抗性菌株再进行复筛。
若没有特殊的筛选方法则需要筛选大量的菌株，一般我们采用诱变后一次筛选200～500株，每个一个摇瓶，从中筛选较好的30～50株进行复筛，每株2～3个摇瓶，再筛选出大概5株进行进一步的研究。
能用平板上的某些特征，如培养特征，产色素情况，某种抗性，某种生理缺陷性状都能起到快速筛选的作用

甚至推测的代谢调控方式都能在诱变育种中起到作用的。

细履平沙

目前生物检测有了高通量检测方法,另外菌种选育工作初筛最重要,而对于初筛筛选模型(筛子)最关键.

jinliuqun

我现在就是用抗生素抗性筛选和耐自身代谢产物进行初筛，不过效果不是太好，大家都在用什么方法啊？

halfz

楼上的方法我很亲切啊，当时我做毕业论文也提出这么做的，老板说没文献报道不敢用，后来我自己偷偷用了次，一下子筛选到了提高产量1倍的菌株，老板就没说什么，还鼓励我发文章呢，呵呵

现在我诱变也经常用这两种方法的，再配合个代谢途径的推理选育，效率还是比较快的

hongkunzh

方法大致差不多.

cuijianli410

我要做的是分离发酵中间产物，现在用的菌得率比较低，因为中间产物不好控制会继续往下代谢，我的这个菌也没有任何标记，那么我要诱变该怎么筛选呢？请教大家。我现在就是诱变完了把菌拿来发酵检测中间产物的量，但是这样太盲目也太费时了

jinliuqun

发酵过程中添加相应的吸附剂可能会改变其代谢途径

cuijianli410

请教楼上，吸附剂是什么？

minger

引用第18楼cuijianli410于2008-09-18 13:14发表的  :
请教楼上，吸附剂是什么？

我觉得可以使用某些树脂，活性炭或者烧结多孔磁环。

这样可能代谢抑制物会暂时被固定。当然培养基中某些成分也会受损失，所以要具体对待。

初筛我们这里为了减少工作量，经常使用短粗的发酵管来加大筛选量，罐子大概直径3cm×高10cm。

其实本身诱变筛选就是一种目的性不是很高的方法，建立筛选模型太重要了。否则精力都耗费在大量的重复工作上

jinliuqun

引用第18楼cuijianli410于2008-09-18 13:14发表的  :
请教楼上，吸附剂是什么？

我用过吸附树脂，直接加在发酵培养基中，如HP20，XAD-7。结果是发酵中间代谢产物提高不少，终产物有所降低。
你可以试一下。诱变筛选还是象19楼说的那样，建立自己的初筛模型比较重要。