菌种诱变

fermenter

有许多,比较沈阳药科大学在阿维菌素选择时使用了紫外+NTG,效果不错,但是这样的方法需要筛选模型与之配合.有没有用基因芯片进行初筛的朋友吗?可以讨论讨论.

zouql2005

引用第12楼jinliuqun于2008-09-11 10:43发表的  :
我现在就是用抗生素抗性筛选和耐自身代谢产物进行初筛，不过效果不是太好，大家都在用什么方法啊？

请问对于那自身代谢产物不溶于水而溶于有机溶剂的,初筛该怎么做呢?

ymy84

最近打算做白腐菌的诱变，头疼的是我的菌不产孢子，我利用菌块做过诱变尝试，结果是紫外30min都不死，看一些文献报道打算用菌丝断片，但是头疼的是我采用文献的方法得不到菌丝断片，我也尝试了不少其他方法，结果还是没有得到好的结果。

不知道有没有哪位高手碰到过这种情况，给指点一下啊

halfz

31楼的，你可以试试先用有机无毒害的将代谢产物溶解后进行细菌过滤，然后再加到灭好菌的培养基中进行下试验。有机溶剂过滤需要采用有机系的细菌滤膜，用我们常用的水系滤膜没法过滤，这点需要注意下。

wyh21413

诱变的工作量是比较大的.而且不一定能筛得有用的.所以要耐心点慢慢做/

jilsfh

大家谈的主要是传统自然菌体变异的筛选！！！目前的主流的朝基因构建菌的发展，，主要是因为：1，有目的的加入基因片段，缩小诱变范围！！！
2，基因的加入过程有载体，便于后期筛选，比如用同位素，荧光标记等，不过目前用得多的还是简单实用的抗生素载体！！！
3，选取的菌种容易活化！！
所以：就算是普通的筛选方法，，不能只靠以量取胜，最重要的是设计较好的方式使菌种朝自己想要的方向发展变异！！比如：做500个随机菌体还不如做5个选择性培养基的菌种！！！

crocodile

31楼的和我正要想做的实验一样，33楼的解释我也考虑过，但是不知道这样产品会不会从培养基中析出呢？

crocodile

32楼的，你的培养菌不可能得不到菌丝碎片，你这样做吧：把培养的斜面菌体用无菌水冲下（充分），然后从10-1——10-10，依次稀释，而后每一浓度进行平板涂布培养，直接拿平皿开盖进行紫外诱变培养，我想得到的单菌落即使你要的。试试看，我做的菌在固体培养基上也基本不产孢子

whbio

高通量筛选是育种的灵魂

zhongzsj

引用第11楼细履平沙于2008-09-10 22:06发表的  :
目前生物检测有了高通量检测方法,另外菌种选育工作初筛最重要,而对于初筛筛选模型(筛子)最关键.

    我也在做诱变，理论上高通量筛选很好很快，不过很难找到一个指标来筛选啊！每次做完诱变筛选都采用传统的摇瓶筛选，累坏了！