【加密1】【原创】【讨论】发酵过程中的失误

lingdong

谢谢大家的经验分享

minger

做发酵灭菌。。罐子是新的，上海一个公司出的。

由于以前上学所在实验室一直做中式，但是我自己没有做过，自以为流程很熟悉。发酵前没有阅读说明书。

罐子是实验室一个系主任第一次操作，灭菌前一直正常，灭菌后控温出现问题，我用时，检修发现加热管烧焦。没有在意，换了一个加热器，空灌检测控温正常。继续使用，同样，灭菌调温到121度，通蒸汽，灭菌正常，降温控温失效，再看加热器又烧焦了。。怒了，打电话给技术支持，长途搞了好多，然后判断是控制加热棒的电路板出问题，免费给寄了一个。又加寄了2个加热器，继续检验，控温正常。。加料，灭菌，降温，控温又失效。。崩溃了

开始不断抱怨国产的罐子不行，后来做实验的时候突然发现，灭菌的同时加热棒的指示灯一直在亮，汗出来了。原来灭菌只是无菌蒸汽自己的事情，软件调温121度是指示加热棒一直加热，当通入蒸汽把夹套中水顶出后，加热棒在蒸汽中不断加热，30分钟后肯定报废。。

这个魔咒终于解除了。。。

经验：
第一，不要盲目自信，看别人做，和自己操作是两码事。
第二，盲目的模仿系主任操作，不问是否正确，也是不对的。
第三，问题出了不要推卸给仪器问题，设计问题。先从自身找问题，此外对设备也要了解，否则很难快速找到错误原因。

vei_20004

楼上的讲的很详细，我们试验罐50L，有次在消毒达到120度时，溶解氧电极从罐内喷出，发酵液从孔中喷出，喷的到处是。还好人员消毒时没有站在电极对面，不然后果不堪设想；喷出之后赶紧关掉总蒸汽阀门；让压力自然下降；最后查到原因是仪表工在安装电极时，没有锁紧；认为不可能从那里喷出。
通过这件事情反应出问题，试验罐消毒人员进罐前根本没有做试压，认为这个根本没有必要去做，因为以前从来就没有去做过。没有认识到事情的严重性。

scutawjx

今天消种子罐，进空气阀的聚四氟已烯密封圈有杂质嵌入，以至阀关不紧，罐内培养基进入精过滤器，要是有做好充分的检查，我想可能就不会有发生这样的事。小心驶得万年船。

congrat123

有一次用灭菌锅灭菌的时候忘记了加水，幸好发现的早，危险呀
小罐空消时，不知道水泵坏了，蒸汽发生器里没有水就开了加热，把加热管都烧了，
发酵罐实消完，忘记关闭夹套排污阀就开冷水进行降温，后来发现好长时间了怎么还没有降下温，才想起来没有关闭夹套排污阀。要细心呀

生工学子

以前在公司 带我的主管消毒的副主任，每天都会在罐底摸阀门，一个阀门摸1个部位，阀体靠近罐的一端，如果烫手，则阀门有可能内漏！

生工学子

VB12发酵过程中需要加入前体进行细胞内的生物合成反应，一个新员工在加入前体罐后忘记打开通向罐的阀门，到发酵完成后基本没有单位。

新手上路

做发酵要注意细节！前段时间做一个菌种，种子罐总是染菌，就是不知道什么原因。最后发现这个罐空罐的时候温度怎么比别的罐温度高，检测后发现显示温度比实际温度高了七度！跟本就没达到实消的121度，不染菌才怪！

三可

有次发酵发现补糖一直控制不住
后来才发现是补糖管上有个小孔
补糖速率高时没有影响，而速率低时补糖基本不进不去。