六月飞雪 发表于 2008-4-13 15:19:28

不错

liuzhuo518 发表于 2008-5-6 16:17:37

学习!

zcjuser 发表于 2008-6-4 23:14:39

1.取干净的载玻片
2.在载玻片上写好发酵时间和管号
3.取发酵液滴在载玻片上,如果很浓,滴加水稀释涂均匀
4.用火烘干或用固定液固定
5.涂上染色液,3分钟后吹干

rbfq 发表于 2008-6-27 20:05:30

引用第43楼violet1980于2008-03-19 09:06发表的 :
我们空培了几次,每次都染菌。很头疼。每次都是三十小时左右,但是之前无菌取样都没发现染菌,然后pH值突然降低,镜检发现染菌很严重,杆菌球菌都有。我们怀疑是过滤器有问题,用平板和肉汤试管取样,平板每次都长菌,而肉汤每次都不长。郁闷死了,不知道是哪里出了问题。我们空气取样是这样做的:蒸汽灭菌15min,吹干,来苏水室内空气消毒,酒精棉擦拭取样口,火焰保护下取样,平板30s,肉汤试管长一些。不知道你们怎么做的?


冷却管打压检漏,我们这染菌严重,最没有想到而偏偏出现的就是冷却管(夹套)渗漏问题

crocodile 发表于 2008-7-2 18:01:33

我们目前正在对改造过一套发酵设备(1吨发酵罐、100升和10升种子罐)进行空培,近一个月以来,连续两次空培均以失败告终。第一次培养温度26度,是在70h发现染菌的,第二次是在20h发现染菌的,开始怀疑是过滤器冷凝水过多造成的染菌,但经实验证实空气过滤系统没有问题,因此我们怀疑是设备阀门的渗漏或者死角造成的染菌,然后我们对阀门进行了修理,保压完好,这次刚上罐,我们非常注意灭菌操作过程,尽量灭掉各个死角,现在培养24h,据DO和pH来看,还算没出问题,不知这次能否成功。。。
我想问一下各位有用三高中试发酵设备的吗?感觉如何?再就是我们的染菌原因不知分析的对不对,空培养37度,96h合适吗?因为我们发酵周期大于一周
谢谢了!

细履平沙 发表于 2008-7-2 18:50:11

还是注意过滤系统的问题,中试罐可以上两套精过滤器。96小时足够了,空培养过程也要注意DO和pH变化,通过这些参数能够在早期发现染菌迹象。

crocodile 发表于 2008-7-5 09:06:07

不错

liuzhiqiong 发表于 2008-7-13 15:54:07

我是做抗生素发酵的,最近生产罐上和摇瓶同时染细杆菌,可以排除菌种带菌,同时可以排除夹套和阀门渗漏,我们考虑很可能是空气中含有大量的杆菌,因为最近经常下雨,空气潮湿,同时现在温度较高(超过30度)利于菌体滋生。

细履平沙 发表于 2008-7-13 17:03:15

摇瓶都染,那要注意一下环境的情况,先将摇瓶染菌解决了,再来解决罐的染菌问题.

004 发表于 2008-7-15 23:09:41

摇瓶染杆菌,可能是培养基没消透。
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查看完整版本: 大家谈一谈染菌的菌型和所染菌的来源